[发明专利]靶向蛋白造影剂、其制备方法及用途

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求于2015年5月11日提交的标题为“TARGETED PROTEIN CONTRAST AGENTS,METHODS OF MAKING,AND USES THEREOF”的共同待决的美国临时专利申请第62/159,685号的权益和优先权，其内容通过引用以其整体并入本文。

背景

磁共振成像(MRI)为一种用于研究和临床应用两者的强大和高度利用的成像技术。因此，存在对用于与MRI一起使用的改进的造影剂的需求。

概述

本文提供了蛋白造影剂，所述蛋白造影剂具有修饰的小清蛋白多肽或其片段和靶向部分，其中所述修饰的小清蛋白多肽或其片段包含顺磁性金属结合位点，所述顺磁性金属结合位点由所述修饰的小清蛋白多肽或其片段的一个或更多个氨基酸残基组成；其中所述靶向部分被可操作地连接至所述修饰的小清蛋白多肽或其片段。修饰的小清蛋白多肽或其片段具有根据SEQ ID NO.10的序列。靶向部分选自以下的组：PSMA结合肽、V1肽或其变体、促胃液素释放肽、HER2特异性亲和体(affibody)、EGFR特异性亲和体、VEGFR结合肽、纤连蛋白、整联蛋白、胶原蛋白及其组合。靶向部分可以具有根据SEQ ID NO.:14-66中任一个的序列。靶向部分可以被直接地融合或者经由柔性肽接头被间接地连接至修饰的小清蛋白多肽或其片段的C-末端、N-末端或C-末端和N-末端两者。靶向部分可以被直接地融合或者经由柔性肽接头被间接地连接至修饰的小清蛋白多肽或其片段的C末端与N末端之间的一个或更多个氨基酸。蛋白造影剂还可以包含顺磁性离子，其中所述顺磁性离子与修饰的小清蛋白多肽或其片段的至少一个氨基酸直接结合。顺磁性离子可以是Gd³⁺。蛋白造影剂可以是PEG化的。蛋白造影剂的疏水性可以经由蛋白造影剂中氨基酸的插入、缺失或取代来改变。蛋白造影剂的亲水性可以经由蛋白造影剂中氨基酸的插入、缺失或取代来改变。修饰的小清蛋白多肽或其片段包含S56D和F103W突变或其结构等同物。

本文还提供了药物组合物，所述药物组合物具有蛋白造影剂，所述蛋白造影剂具有修饰的小清蛋白多肽或其片段和靶向部分，其中所述修饰的小清蛋白多肽或其片段包含顺磁性金属结合位点，所述顺磁性金属结合位点由所述修饰的小清蛋白多肽或其片段的一个或更多个氨基酸残基组成；其中所述靶向部分被可操作地连接至所述修饰的小清蛋白多肽或其片段。

本文还提供了将蛋白造影剂施用至受试者并且使用磁共振成像使受试者的至少一部分成像的方法，所述蛋白造影剂具有修饰的小清蛋白多肽或其片段和靶向部分，其中所述修饰的小清蛋白多肽或其片段包含顺磁性金属结合位点，所述顺磁性金属结合位点由所述修饰的小清蛋白多肽或其片段的一个或更多个氨基酸残基组成；其中所述靶向部分被可操作地连接至所述修饰的小清蛋白多肽或其片段。

本文还提供了蛋白造影剂，所述蛋白造影剂具有修饰的钙调蛋白多肽或其片段和靶向部分，其中所述修饰的钙调蛋白多肽或其片段包含顺磁性金属结合位点，所述顺磁性金属结合位点由所述修饰的钙调蛋白多肽或其片段的一个或更多个氨基酸残基组成；其中所述靶向部分被可操作地连接至所述修饰的钙调蛋白多肽或其片段。修饰的钙调蛋白多肽或其片段具有根据SEQ ID NO.13的序列。靶向部分可以选自以下的组：PSMA结合肽、V1肽或其变体、促胃液素释放肽、HER2特异性亲和体、EGFR特异性亲和体、VEGFR结合肽、纤连蛋白、整联蛋白、胶原蛋白及其组合。靶向部分可以具有根据SEQ ID NO.:14-66中任一个的序列。靶向部分可以被直接地融合或者经由柔性肽接头被间接地连接至修饰的钙调蛋白多肽或其片段的C-末端、N-末端或C-末端和N-末端两者。靶向部分可以被直接地融合或者经由柔性肽接头被间接地连接至修饰的钙调蛋白多肽或其片段的C末端与N末端之间的一个或更多个氨基酸。蛋白造影剂还可以具有顺磁性离子，其中所述顺磁性离子与修饰的钙调蛋白多肽或其片段的至少一个氨基酸直接结合。顺磁性离子可以是Gd³⁺。蛋白造影剂可以是PEG化的。蛋白造影剂或其部分的疏水性可以经由蛋白造影剂中氨基酸的插入、缺失或取代来改变。蛋白造影剂的亲水性经由蛋白造影剂中氨基酸的插入、缺失或取代来改变。蛋白造影剂具有根据SEQ ID NO.:70的序列。