[发明专利]用于细胞施予、保存、或培养的容器

说明书

使用下述容器施予哺乳动物细胞、或者在该容器内保存或培养哺乳动物细胞时，能够有效地抑制细胞向容器内表面的黏附以及细胞存活率降低，所述容器的与哺乳动物细胞接触的表面由含有至少一部分‑CF₃末端基团的氟树脂原料形成，或者，所述容器的与哺乳动物细胞接触的表面由氟树脂中的非氟代基团末端和‑CF₂H基团末端的总数量是每1×10⁶个碳为70个以下的氟树脂材料形成。因此，通过使用上述容器，能够施予、保存、或制备高浓度且活细胞的比例高的含有哺乳动物细胞的液体，从而有助于利用含有哺乳动物细胞的液体(悬浮液)的再生医疗。

技术领域

本发明涉及用于哺乳动物细胞的施予、保存、或培养的容器，所述容器的与哺乳动物细胞接触的表面由含有1个以上-CF₃末端基团的氟树脂、或氟树脂中的非氟代基团末端和-CF₂H基团末端的总数量是每1×10⁶个碳为70个以下的氟树脂形成。

背景技术

胚胎干细胞(Embryonic Stem cell，ES细胞)、诱导多能干细胞(inducedpluripotent stem cell，iPS细胞)等多能干细胞是具有无限的增殖能力和分化为多种组织细胞的多分化能力的细胞。对于人多能干细胞而言，期待进一步通过在试管内的分化诱导而使其分化成具有各种功能的细胞，然后施予至期待施予效果的患者，从而应用于再生医疗。另外，对于间充质干细胞等成体干细胞而言，期待其具有通过释放营养因子、细胞因子而得到的治疗效果、在聚集(homing)于组织的损伤部位后分化成该部位的构成细胞而进行补充修复的效果，并在临床研究中展开尝试。为了实现这些目的，需要稳定地大量培养或保存高品质的细胞、在维持该品质的状态下进行施予。

作为培养悬浮性细胞的容器，考虑了袋状的培养容器(袋)(专利文献1)。该袋是由在聚(乙烯丁烯)聚苯乙烯嵌段共聚物和聚丙烯的聚合物混合物中混合乙烯丙烯酸酯共聚物而得到的聚合物合金形成的，其特征在于，透明性、气体透过性优异。另一方面，也考虑了适合培养黏附性细胞的袋(专利文献2、3)。专利文献2中公开的袋经过了改良，通过对袋内表面进行电晕放电处理来提高亲水性，以使细胞容易黏附。另外，专利文献3中公开的袋由具有规定的折弯刚性的合成树脂片材形成，从而使得袋在培养中不易变形，其特征在于，能够防止由在移动袋时容器发生变形而导致的细胞剥离、死亡。

此外，袋的市售品也是已知的，例如，乙烯(Et)-乙酸乙烯酯(VA)共聚物(EVA)原料的CultiLife[注册商标]Spin袋(TAKARA公司制)、以作为氟树脂的四氟乙烯(TFE)-六氟丙烯(HFP)共聚物(FEP)为材料的VueLife FEP Bag 32-C(American FluorosealCorporation公司制)、培养袋A-1000NL(NIPRO公司制)等已有市售。

然而，这些袋均不是用于抑制黏附性细胞向袋内表面黏附、以悬浮状态维持或培养细胞的袋。

另一方面，已知使用将TFE-全氟烷基乙烯基醚(PFVE)共聚物(PFA)的不稳定末端基团进行氟取代从而将其除去而得到的氟树脂膜来覆盖食品加热加工器具的表面时，可提高针对焦渍的防污性(专利文献4)。然而，由对末端基团进行氟取代而得到的氟代树脂所带来的细胞黏附性尚未为人所知。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开平3-65177号公报

专利文献2：日本特开平6-98756号公报

专利文献3：日本特开2008-17839号公报

专利文献4：日本专利3962153号公报

发明内容

发明所要解决的课题

本发明的课题在于，提供能够施予、保存、或制备高浓度且活细胞的比例高的含有哺乳动物细胞的液体。