[发明专利]AAV-介导的抗-流感抗体的表达及其使用方法

权利要求书

1.一种可用于递送两种抗流感抗体构建体的组合用于针对流感感染进行被动免疫的组合物，所述组合物包含：

(i) 具有AAV9衣壳(rAAV9)和具有载体基因组的第一非复制重组腺相关伴随病毒，所述载体基因组包含：(a) AAV反向末端重复序列(ITR)，(b) 增强子，(c) 启动子，(d) 内含子，(e) 5’ UTR，(f) 编码可操作地连接于FI6v3可变重链的前导肽的核酸序列，(g) 编码FI6v3可变重链的核酸序列，(h) 编码人CH1结构域和人IgG1 Fc链(CH2-3)的核酸序列，(i)编码弗林蛋白酶识别位点的核酸序列，(j) F2A接头，(k) 编码可操作地连接于免疫球蛋白轻链的前导肽的核酸序列，(l) 编码免疫球蛋白轻链的核酸序列，(m) 多腺苷酸化信号，和(n) AAV反向末端重复序列；

(ii) 第二非复制rAAV9，其中第二rAAV9具有AAV9衣壳和载体基因组，所述载体基因组包含：(a) AAV反向末端重复序列(ITR)，(b) 增强子，(c) 启动子，(d) 内含子，(e) 5’UTR，(f) 编码可操作地连接于CR8033重链的前导肽的核酸序列，(g) 编码CR8033可变重链的核酸序列，(h) 编码人CH1结构域和人IgG1 Fc链(CH2-3)的核酸序列，(i) 编码弗林蛋白酶识别位点的核酸序列，(j) F2A接头，(k) 编码可操作地连接于免疫球蛋白轻链的前导肽的核酸序列，(l) 编码轻链的核酸序列，(m) 多腺苷酸化信号，和(n) AAV反向末端重复序列；

和含水液体悬浮基质。

2.依据权利要求1的组合物，其中对于(i)的载体基因组选自：SEQ ID NO: 1、14、15和16。

3.依据权利要求1的组合物，其中对于(ii)的载体基因组包含SEQ ID NO: 8。

4.依据权利要求1的组合物，其中对于(i)和/或(ii)的启动子独立地选自鸡β-肌动蛋白(CB)启动子、人巨细胞病毒(CMV)启动子、类人猿病毒40 (SV40)的早期和晚期启动子、U6启动子、金属硫蛋白启动子、EFlα启动子、遍在蛋白启动子、次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶(HPRT)启动子、二氢叶酸还原酶(DHFR)启动子、腺苷脱氨酶启动子、磷酸甘油激酶(PGK)启动子、丙酮酸激酶启动子、磷酸甘油变位酶启动子、β-肌动蛋白启动子、UbB启动子、UbC启动子、莫洛尼氏白血病病毒和其它逆病毒的长末端重复序列(LTR)、或单纯疱疹病毒的胸苷激酶启动子。

5.依据权利要求4的组合物，其中所述启动子是鸡β-肌动蛋白(CB)启动子。

6.依据权利要求1的组合物，其中来自(i)和(ii)的rAAV9的总浓度是1x10¹¹-6x10¹³基因组拷贝(GC)/mL，其中GC使用微滴式数字PCR (ddPCR)测定。

7.依据权利要求1的组合物，其中(i)的rAAV9与(ii)的rAAV9的比例是约1:1。

8.依据权利要求1的组合物，其中(i)和/或(ii)中的轻链来自与重链源异源的免疫球蛋白源。

9.依据权利要求1的组合物，其中(i)和(ii)中的轻链来自相同的来源。

10.依据权利要求1的组合物，其中可变轻链是没有限定的特异性的种系抗体序列。

11.依据权利要求10的组合物，其中轻链是κ链。

12.依据权利要求11的组合物，其中所述轻链是人κ链种系IGKV4-1*101。

13.依据权利要求1的组合物，其中(i)或(ii)的5’UTR独立地选自人c-myc 5’UTR。