[发明专利]用于下一代测序的高分子量DNA样品追踪标签有效
申请号: | 201680043622.X | 申请日: | 2016-09-28 |
公开(公告)号: | CN108138228B | 公开(公告)日: | 2022-05-27 |
发明(设计)人: | 马丁·冉妮科;埃里克·范德沃特;保罗·麦克尤恩 | 申请(专利权)人: | 卡帕生物系统公司 |
主分类号: | C12Q1/6869 | 分类号: | C12Q1/6869 |
代理公司: | 深圳永慧知识产权代理事务所(普通合伙) 44378 | 代理人: | 黄鑫 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 下一代 分子量 dna 样品 追踪 标签 | ||
1.一种合成的核酸标签,其核酸序列包含结构A-B-C的多个重复单元,所述合成的核酸标签具有由下式表示的总体结构:
Xi-[A-B-C]n-Yj,
其中,所述合成的核酸标签包括n个重复的所述结构A-B-C
其中,n为至少2,
其中,A、B和C中的每一个是具有至少两个核苷酸残基的限定长度的核酸,
其中,所述合成的核酸标签包含i个重复的X,
其中,所述合成的核酸标签包括j个重复的Y,
其中,X是上述C、除上述C外的另一种核酸和对标签末端进行的核酸修饰中的至少一个,
其中,Y是上述A、除上述A外的另一种核酸和对标签末端进行的核酸修饰中的至少一个,
其中,X或Y不是B,
并且其中i和j是独立地选自0-100的整数,
至少B具有不与在用于分析的样品中发现的任何序列杂交的序列,并且参考序列分析程序BLASTN所测定的,B与样品中的任一序列有低于10%的同一性,
其中,B具有足够的长度以确保不同标签中个体B元件之间至少为2的莱文斯坦距离,
所述标签的长度大于2千碱基。
2.如权利要求1所述的标签,其中:
A和C中的每一个包含至少一个引物着陆点序列元件,在所述引物着陆点序列元件中与其杂交的引物可以被延伸,并且
另外其中,A和C具有彼此相容的核苷酸序列,在所述核苷酸序列中相反方向的引物可以同时与A和C两者杂交,从而通过延伸所杂交的引物产生扩增产物。
3.一组用于序列分析的样品,其中,每个样品含有至少一种根据权利要求1所述的合成的核酸标签,
其中,A和C各自为长度至少8个核酸,并且其中A和C为相同长度和不同长度之一;并且
其中,B包含至少8个核酸。
4.如权利要求1所述的标签,其中,所述标签的至少一部分是双链的。
5.如权利要求1的标签,其中,所述标签包含至少一个甲基化的核苷酸。
6.如权利要求1的标签,其中,所述标签包含至少一个结合部分。
7.如权利要求1所述的标签,其中,所述标签包含用于RNA聚合酶的至少一个启动子序列。
8.如权利要求1所述的标签,其中,所述标签是设置在收集容器、以及被吸附到收集工具表面上中的一种。
9.一种包含如权利要求1所述的标签的试剂盒。
10.如权利要求9所述的试剂盒,其中:
所述试剂盒中的不同标签在结构上彼此相关,其中:
每种标签具有相同的A序列元件;
每种标签具有相同的C序列元件;并且
每种标签具有B序列元件,所述B序列元件与所述试剂盒中其他标签中的每一种的B序列元件不同。
11.如权利要求9所述的试剂盒,还包括样品收集管。
12.如权利要求9所述的试剂盒,其中,所述多种核酸分子标签的至少一部分包含至少一个甲基化的核苷酸。
13.如权利要求9所述的试剂盒,其中,所述多种核酸分子标签的至少一部分包含至少一个结合部分。
14.如权利要求13所述的试剂盒,其中,所述结合部分是生物素。
15.如权利要求9所述的试剂盒,其中,所述多种核酸分子标签的至少一部分包含用于RNA聚合酶的至少一个启动子序列。
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