[发明专利]循环肿瘤细胞有丝分裂指数在癌症分层和诊断中的应用

权利要求书

1.确定循环肿瘤细胞(CTC)群的细胞周期阶段的试剂在制备用于确定CTC群有丝分裂指数来预测患有癌症的受试者存活可能性或监测患有癌症的受试者的癌症治疗效果的试剂中的用途，其中，确定CTC群有丝分裂指数包括：

（a）从患有癌症的受试者的生物样本中获取CTC群，

（b）确定所述CTC群中每个CTC的细胞周期阶段，以及

（c）计算CTC群的有丝分裂指数，从而确定CTC群的有丝分裂指数，

其中有丝分裂指数是样本中有丝分裂CTC和非有丝分裂CTC的数量之比、或有丝分裂CTC和所有CTC的数量之比。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述生物样本选自血液、淋巴结、骨髓、脑脊髓液和尿液组成的组。

3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述生物样本为至少7.5 mL的外周血。

4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，癌症是恶性上皮肿瘤，所述CTC是以以下特点中的一个或多个为特征：

（a）直径在7微米到25微米之间，

（b）一个或多个标志物的存在，所述标志物选自细胞角蛋白（CK）8、CK18、CK19和EpCAM组成的组，以及

（c）一个或多个标志物的缺乏，所述标志物选自CD45、CD14和CD31组成的组。

5.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述CTC的进一步特征在于一个或多个标志物的存在，所述标志物选自EGFR、HER2、MUC-1、EphB4、CEA、CK5、CK6、CK7、CK14、CK16、CK17、CK20、PLZ4、PSMA、PSA、PDX-1、CXCR-4和CDX2组成的组。

6.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述恶性上皮肿瘤为乳腺肿瘤、前列腺肿瘤、肺肿瘤、结直肠肿瘤或胰腺肿瘤，以及所述CTC是以以下特点为特征：

（a）直径在7微米到25微米之间，

（b）CK8、CK18、CK19和EpCAM的存在，以及

（c）CD45的缺乏。

7.如权利要求1所述的用途，其特征在于，癌症是黑素瘤，所述CTC是以以下特点中的一个或多个为特征：

（a）直径在7微米到25微米之间，以及

（b）一个或多个标志物的存在，所述标志物选自CD146、黑色素、PAX3d、MLANA、TGFβ2、MCAM、ABCB4、CSPG4、MART-1、MAGE-A3以及GAINAc-T组成的组。

8.如权利要求1所述的用途，其特征在于，癌症是肉瘤，所述CTC是以以下特点中的一个或多个为特征：

（a）直径在7微米到25微米之间，以及

（b）波形蛋白的存在。

9.如权利要求1所述的用途，其特征在于，癌症是肾细胞恶性上皮肿瘤，所述CTC是以以下特点中的一个或多个为特征：

（a）直径在7微米到25微米之间，以及

（b）一个或多个标志物的存在，所述标志物选自波形蛋白、CD10、CK8、CK18、CK19、c-kit以及E-钙粘蛋白组成的组。

10.如权利要求1-9中任意一项所述的用途，其特征在于，细胞周期阶段是用核染色剂染色细胞来确定，并在通过目视确定所述细胞周期阶段。

11.如权利要求1-9中任意一项所述的用途，其特征在于，有丝分裂指数是通过将确定在有丝分裂细胞周期阶段的CTC的数量除以确定在非有丝分裂细胞周期阶段的CTC的数量来进行计算。