[发明专利]用于分离基质血管部分的机械仪器和方法

说明书

本发明涉及用于在脂肪抽出后分离基质血管部分(SVF)的仪器和方法。

技术领域

本发明总体上涉及用于分离具有独特构造的基质血管部分(SVF)的非酶方法和用于实施该方法的仪器。

背景技术

脂肪组织代表了丰富且易得到的成体干细胞来源，成体干细胞能够沿着多条谱系途径进行分化。已经证明获得自脂肪组织的脂肪抽出物可用作不同类型干细胞/祖细胞的易得到且丰富的来源，干细胞/祖细胞具有适合于组织工程和再生医学应用的多潜能特征[1]。

脂肪组织的酶消化最常用于加工脂肪抽出物。例如，先前已经通过切碎大鼠脂肪垫、洗涤以除去受污染的造血细胞以及用胶原酶孵育组织片段以从颗粒状基质血管部分(SVF)中分离成熟脂肪细胞的漂浮群体，来进行用于分离脂肪干细胞/祖细胞的脂肪抽出物的加工[2]。

脂肪抽吸手术的发展已简化了该程序。在脂肪抽吸期间，外科医生经由插管向皮下组织注入含有麻醉剂和/或肾上腺素的盐溶液，并且然后在吸引的情况下去除液体和组织两者，以典型地产生精细切碎的组织片段，这些组织片段的大小取决于插管的尺寸[3]。

因此，可以将人脂肪干细胞/基质细胞容易地从活组织检查和脂肪抽吸样本分离[4]；可以使用粘连柱从脂肪抽吸抽出物的液体部分衍生[5]；并且还可以通过非酶机械解离程序从人脂肪抽出物样品分离[6]。

当定量研究离心对脂肪抽吸抽出物的影响以优化脂肪移植和脂肪干细胞的分离的离心条件时，Kurita M等人建议1200x g作为优化的离心力，以便在脂肪移植中获得好的短期结果和长期结果[7]。

Shah A等人描述了洗涤脂肪组织用于分离人脂肪组织基质干细胞的非酶方法[8]。

最近，已经描述了许多用于从脂肪抽出物分离脂肪祖细胞和/或干细胞的机械装置。

US 2012/264213[9]披露了脂肪抽出物提取装置，该装置有助于从在脂肪抽吸期间获得的流体中机械释放的脂肪祖细胞和/或干细胞的收集和加工。

US 2013/034524[10]披露了用于使用机械破碎和过滤-离心的组合从脂肪组织提取、分离和浓缩临床有用的再生细胞，以获得高度富集的干细胞群体的装置和方法。

Alexander RW[11]报道了使用微插管脂肪抽出物经历机械乳化，以提供成体成熟脂肪细胞裂解、保存可通过小孔针注射的小颗粒形式的组织基质血管部分(tSVF)的差异。

出版物

[1]Gimle J,Circulation Research.[循环研究]2007,100:1249-1260；

[2]Rodbell M和Jones AB,J Biol Chem[生物化学杂志]，1966；241:140-142；

[3]Illouz YG.Plast Reconstr Surg[整形与重建外科杂志]，1983；72:591-597；

[4]Dubois SG等人，Methods Mol Biol[分子生物学方法]，2008；449:69-79；

[5]Kentaro Doi1等人，Cytotherapy[细胞疗法]，第16卷，第3期，2014，第381-391页；

[6]Baptista LS等人，Cytotherapy[细胞疗法]，2009；11(6):706-15；

[7]Kurita M等人，Plast Reconstr Surg.[整形与重建外科杂志]2008,121(3):1033-41；

[8]Shah S等人，Cytotherapy[细胞疗法杂志]，15(8),2013，第979-985页