[发明专利]甜菊醇糖苷转运有效
申请号: | 201680047030.5 | 申请日: | 2016-08-15 |
公开(公告)号: | CN107922465B | 公开(公告)日: | 2021-12-24 |
发明(设计)人: | 维克托·马里厄斯·波尔;普利斯希勒·扎尔特简斯;埃里克·范·德恩·伯格 | 申请(专利权)人: | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 |
主分类号: | C07K14/39 | 分类号: | C07K14/39;C12P19/56;C12P15/00;C12N1/16;A23L2/60 |
代理公司: | 北京东方亿思知识产权代理有限责任公司 11258 | 代理人: | 肖善强 |
地址: | 荷兰*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甜菊醇 糖苷 转运 | ||
1.一种能够产生甜菊醇糖苷的重组宿主,所述重组宿主过表达介导甜菊醇糖苷转运的多肽,并且所述多肽的氨基酸序列是如SEQ ID NO:29所示的。
2.一种能够产生甜菊醇糖苷的重组宿主,所述重组宿主已被修饰,优选在其基因组中被修饰,以导致介导甜菊醇糖苷转运的多肽的产生缺陷,并且所述多肽的氨基酸序列是如SEQ ID NO:29所示的。
3.根据权利要求1所述的重组宿主,所述重组宿主包含编码多肽的重组核酸,所述多肽的氨基酸序列是如SEQ ID NO:29所示的。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的重组宿主,其包含一种或更多种编码以下多肽的重组核苷酸序列:
具有对映-柯巴基焦磷酸合酶活性的多肽;
具有对映-贝壳杉烯合酶活性的多肽;
具有对映-贝壳杉烯氧化酶活性的多肽;以及
具有贝壳杉烯酸13-羟化酶活性的多肽。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的重组宿主,其包含编码具有NADPH-细胞色素p450还原酶活性的多肽的重组核酸序列。
6.根据权利要求1至3中任一项所述的重组宿主,其包含编码以下项中的一种或更多种的重组核酸序列:
(i)具有UGT74G1活性的多肽;
(ii)具有UGT2活性的多肽;
(iii)具有UGT85C2活性的多肽;和
(iv)具有UGT76G1活性的多肽。
7.根据权利要求1至3中任一项所述的重组宿主,其中所述宿主属于Saccharomyces、Aspergillus、Pichia、Kluyveromyces、Candida、Hansenula、Humicola、Issatchenkia、Trichosporon、Brettanomyces、Pachysolen、Yarrowia、Yamadazyma或Escherichia属中的一种。
8.根据权利要求7所述的重组宿主,其中所述重组宿主是Saccharomyces cerevisiae细胞、Yarrowia lipolytica细胞、Candida krusei细胞、Issatchenkia orientalis细胞或Escherichia coli细胞。
9.根据权利要求1至3中任一项所述的重组宿主,其中所述宿主产生香叶基香叶基二磷酸(GGPP)的能力被上调。
10.根据权利要求1至3中任一项所述的重组宿主,其包含编码以下项中的一种或更多种的核酸序列:
具有羟甲基戊二酰基-辅酶A还原酶活性的多肽;或者
具有法尼基-焦磷酸合成酶活性的多肽。
11.一种制备甜菊醇糖苷的方法,所述方法包括在合适的发酵培养基中发酵根据权利要求1至10中任一项所述的重组宿主,以及任选地回收所述甜菊醇糖苷。
12.根据权利要求11所述的制备甜菊醇糖苷的方法,其中所述方法以工业规模进行。
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