[发明专利]用于生产TCRγδ+ 有效
申请号: | 201680047265.4 | 申请日: | 2016-06-08 |
公开(公告)号: | CN108350428B | 公开(公告)日: | 2022-04-22 |
发明(设计)人: | 迪奥戈·安东尼奥·雷梅希多·安乔斯;丹尼尔·瓦格斯·科雷亚;阿方索·罗恰·马丁斯·德·阿尔梅达 | 申请(专利权)人: | 淋巴-淋巴细胞活化技术公司 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783;A61K35/17 |
代理公司: | 华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 刘培培;黄爱娇 |
地址: | 葡萄牙*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 生产 tcr base sup | ||
1.一种用于扩增样品中的Vδ2- TCRγδ+ T细胞的方法,所述方法包括:
(1)在不存在白细胞介素-15、白细胞介素-2或白细胞介素-7的情况下,在包含T细胞有丝分裂原和白细胞介素-4的第一培养基中培养所述样品中的细胞;和
(2)在不存在白细胞介素-4的情况下,在包含T细胞有丝分裂原和选自白细胞介素-15、白细胞介素-2或白细胞介素-7的生长因子的第二培养基中培养步骤(1)中获得的所述细胞。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中的生长因子为白细胞介素-15。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述第一或第二培养基,或两种培养基,进一步包括第二生长因子。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述生长因子为干扰素-γ。
5.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述第一或第二培养基,或两种培养基,进一步包括第二和第三生长因子。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述生长因子为干扰素-γ和白细胞介素-21。
7.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述第一或第二培养基,或两种培养基,进一步包括第二、第三和第四生长因子。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述生长因子为干扰素-γ,白细胞介素-21和白细胞介素-1β。
9.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述第一或第二培养基,或两种培养基,进一步包括Vδ2- TCRγδ+ T细胞的共刺激分子。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述共刺激分子为SLAM受体的分子配体或激动剂,CD27受体的分子配体或激动剂,或CD7受体的分子配体或激动剂。
11.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述第一和第二培养基进一步包含血清或血浆。
12.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,在所述在步骤(1)之前,所述样品中的所述细胞富集T细胞。
13.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,在所述在步骤(1)之前,所述样品中的所述细胞富集TCRγδ+ T细胞。
14.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,在所述在步骤(1)之前,所述样品中的所述细胞耗尽了TCRαβ+ T细胞。
15.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,在所述在步骤(1)之前,所述样品中的所述细胞首先耗尽TCRαβ+ T细胞,然后富集CD3+细胞。
16.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,在所述在步骤(1)之前,所述样品中的所述细胞耗尽了非TCRγδ+ T细胞。
17.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述样品为血液或组织或其部分。
18.根据权利要求17所述的方法,其特征在于,所述样品选自外周血、脐带血、淋巴组织、上皮、胸腺、骨髓、脾脏、肝脏、癌组织、感染组织、淋巴结组织或其部分。
19.根据权利要求17所述的方法,其特征在于,所述样品为人外周血或其部分。
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