[发明专利]具有患者衍生异种移植物的非HLA匹配的人源化NSG小鼠模型

权利要求书

1.一种产生具有患者衍生异种移植物的人源化免疫缺陷非肥胖糖尿病(NOD)小鼠的方法，所述方法包括：

(1)向免疫缺陷非肥胖糖尿病小鼠中引入CD34⁺人造血干细胞(HSC)，其中所述小鼠：

(a)对于scid突变是纯合的，和

(b)具有IL-2受体γ链缺陷；和

(2)用人患者衍生异种移植物(PDX)接种所述小鼠以产生具有患者衍生异种移植物的人源化免疫缺陷NOD小鼠，

其中所述HSC和所述PDX是非HLA匹配的。

2.权利要求1所述的方法，其中所述人源化免疫缺陷NOD小鼠

(1)对于scid突变是纯合的；

(2)具有IL-2受体γ链缺陷；

(3)被移植CD34⁺人造血干细胞(HSC)；和

(4)被接种人患者衍生异种移植物(PDX)；

其中所述HSC和所述PDX是非HLA匹配的。

3.权利要求1所述的方法，其中所述小鼠还包含组成型表达人白介素-3(IL-3)、人粒细胞/巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)和/或人Steel因子(SF)的转基因。

4.权利要求1所述的方法，其中所述scid突变是Cg-Prkdc^scid。

5.权利要求1所述的方法，其中所述IL-2受体γ链缺陷是Il2rg^tm1Wjl。

6.权利要求1所述的方法，其为NOD.Cg-Prkdc^scid Il2rg^tm1Wjl/SzJ(即NOD scidγ(NSG))。

7.权利要求1所述的方法，其中所述CD34⁺人HSC通过尾静脉注射移植，任选其中所述小鼠为雌性小鼠。

8.权利要求1所述的方法，其中所述CD34⁺人HSC被移植到约3周龄的所述小鼠。

9.权利要求1所述的方法，其中所述CD34⁺人HSC在所述小鼠的全身照射(例如，以约700至1300cGy的剂量)后移植。

10.权利要求1所述的方法，其中所述人PDX在所述小鼠被移植所述CD34⁺人HSC后约2周后被接种至所述小鼠。

11.权利要求1所述的方法，其中所述人PDX在所述小鼠被移植所述CD34⁺人HSC后约12周后被接种至所述小鼠。

12.权利要求1所述的方法，其中所述人PDX来自原代患者样品。

13.权利要求1所述的方法，其中所述人PDX来自已经被作为异种移植物传代至少一代的存档的肿瘤样品。

14.权利要求1所述的方法，其中所述人PDX是来自卵巢癌、肺癌例如非小细胞肺癌(NSCLC)、膀胱癌、淋巴瘤，任选为AML、CML、ALL、CLL、DLBCL(弥漫性大B细胞淋巴瘤)、乳腺癌，任选为三阴性乳腺癌(TNBC)、或脑癌、胰腺癌、前列腺癌、结肠癌、结直肠癌、子宫内膜癌、胃/GIST癌、肝细胞癌、肾脏/肾癌、皮肤癌，任选为黑素瘤、软组织癌、肉瘤或癌细胞系的异种移植物。

15.权利要求1所述的方法，其中约5×10⁶个细胞的所述人PDX被接种。

16.权利要求1所述的方法，其中在PDX接种后约50天，或任选地在HSC移植后约9周，所述小鼠的外周血中的人CD45⁺细胞的百分比达到约20-30％。