[发明专利]用于检测至少一个第一抑制区存在或不存在的方法有效

专利信息
申请号: 201680050614.8 申请日: 2016-07-06
公开(公告)号: CN108474019B 公开(公告)日: 2022-02-01
发明(设计)人: L·德拉泽克;A·杜邦-菲拉德;F·平斯通;H·罗斯坦 申请(专利权)人: 生物梅里埃公司
主分类号: C12Q1/18 分类号: C12Q1/18;C12Q1/04;C12Q1/20
代理公司: 永新专利商标代理有限公司 72002 代理人: 左路;林晓红
地址: 法国迈合西*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 用于 检测 至少 一个 第一 抑制 存在 不存在 方法
【权利要求书】:

1.一种用于检测至少一个抑制区(9)存在或不存在的方法,所述方法包括由下述组成的步骤:

a.提供琼脂培养基(2);

b.提供液体形式的含有或易于含有微生物的样品(1);

c.沿着设置区(8)以液滴设置一定体积的液体形式的样品(1),所述设置区(8)沿着在琼脂培养基的表面处的轴线(7)延伸;

d.将确定量的化学试剂(5)设置在琼脂培养基(2)的表面处,所述设置限定了潜在的抑制区(6),所述样品的设置区的轴线与所述潜在的抑制区相交;

e.温育所述琼脂培养基(2);

f.测定所述抑制区(9)的存在或不存在。

2.根据权利要求1的方法:

-其中借助于预定的设置技术设置所述体积的样品,所述设置技术对于一定体积的液体形式的样品中的微生物的给定生物量,适于将所述体积设置在琼脂培养基的最大表面积上,以便获得大于预定阈值的基本上均匀的微生物表面密度;

-其中借助于粗制样品的预培养来获得所述样品,所述预培养包括微生物菌株的分离阶段,随后为所述菌株的温育阶段,以便增加微生物的生物量,所述生物量取决于温育的持续时间;和

-其中所述粗制样品的温育持续时间选择为小于10小时,选择由预限定的设置技术设置的所述体积的样品的表面积,以获得所述密度。

3.根据权利要求2的方法,其中获得用于在所述密度下设置在所述琼脂培养基的整个表面上的足够生物量所必要的温育持续时间大于20小时。

4.根据权利要求1-3任一项的方法,所述样品包含已知类型的微生物的培养物,所述潜在的抑制区的面积由所述类型的微生物限定。

5.根据权利要求1-3任一项的方法,其特征在于,所述步骤c)由下述组成:

c.沿着设置区以连续线设置一定体积的液体形式的样品,所述设置区沿着在所述琼脂培养基的表面处的轴线延伸。

6.根据权利要求1-3任一项的方法,其特征在于,所述样品的浓度在0.0005McFarland和0.5McFarland之间。

7.根据权利要求1-3任一项的方法,其特征在于,所设置的液滴通过预定的间距P间隔开。

8.根据权利要求7的方法,其中所述预定的间距由所述潜在抑制区的面积和/或所设置的液滴的直径预定。

9.根据权利要求1-3任一项的方法,其特征在于,所设置的液滴通过在毫米范围内的间距间隔开。

10.根据权利要求9的方法,其中所述间距为一毫米。

11.根据权利要求1-3任一项的方法,其特征在于,每个设置的液滴的体积在1nl和10μl之间。

12.根据权利要求1-3任一项的方法,其特征在于,每个设置的液滴中含有的微生物的量是已知的,并且是1个微生物/滴至106个微生物/滴。

13.根据权利要求12的方法,其中所述微生物的量是104个微生物/滴。

14.根据权利要求1-3任一项的方法,其特征在于,所述方法包括由下述组成的步骤:

-测定潜在的抑制区中的被抑制液滴(1c)的数目和/或样品的设置区中的未抑制液滴(1a)的数目。

15.根据权利要求1-3任一项的方法,其特征在于,所述步骤d)由下述组成:

d.将浸渍有确定量的化学试剂的支撑物(3)设置在琼脂培养基的表面处,所述支撑物限定了潜在的抑制区,所述样品的设置区与潜在的抑制区相交。

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