[发明专利]观察标本制作用细胞保持基材保持件及包括其的套件以及观察标本的制作方法

说明书

技术领域

本发明涉及：能够在出于对细胞实施各种染色并利用显微镜(光学、荧光)进行观察的目的而制作的观察标本的制作中使用的细胞保持基材保持件及包括其的套件、以及观察标本的制作方法，更详细而言，涉及：实施了在细胞诊(细胞诊断)中实施的病理染色中的、湿固定和其后的使用染色槽的染色(巴氏染色、PAS染色、阿尔新蓝染色等)的观察标本的制作方法。

背景技术

该领域主要用于癌的诊断，并按下述步骤实施：由采集自患者的细胞制作观察标本，具有细胞诊断士、细胞诊断专门医、病理专门医等资格的人进行镜检，检出异常细胞(异型细胞)。此外，该领域主要在医院等医疗机构实施，需要每天制作并检查大量的检体(观察标本、镜检标本)。

细胞诊根据细胞的采集方法分类，包括有：对混入有剥离的细胞的体液进行采集的剥离细胞诊(痰、尿、胸水、腹水、心包液、脑脊液、胆汁等)；将刷子、棉棒等插入体内并擦过病变部从而采集细胞的脱落细胞诊(子宫颈部或子宫体部、支气管、胆管、胰管等)；将细针刺入病变部并进行吸取从而采集细胞的穿刺吸取细胞诊(乳腺、甲状腺、淋巴结、肝脏等)等，将这些采集的细胞涂抹于观察用基板(载玻片)，制作观察标本。向载玻片的涂抹多以将细胞分散于液体的状态进行，在采集的状态不是体液等液状的情况下，有时在分散于固定液体后进行涂抹(液状化检体细胞诊)。

“细胞染色”除了该领域以外还存在多种领域。根据制作而成的观察标本的使用目的(完成度)不同，染色方法、试剂、器具、设备也完全不同。染色的目的例如可列举出：将组织根据细胞种类不同染成不同颜色，从而明确各自的位置(例：免疫组织染色)；以细胞具有的一些标记、形态学特征为基础，只要利用装置能够检出目的细胞的数目、染色强度即可(例：高内涵筛选、流式细胞术)；前述的目的中，利用人眼进行观察(例：血细胞计数器的细胞计数)；将细胞内外的目标物质染色，从而观察位置(例：荧光显微镜观察)；观察细胞器的形状、颜色(例：细胞诊)；进一步详细观察到乃至细胞器内部结构(例：电子显微镜观察)，但在该领域中，通过光学显微镜下的观察来进行观察，要求以能够充分观察细胞器的观察倍率(大约200～400倍)，取得能够判别细胞器的形状、染色的颜色及浓淡的观察影像。

此外，由于所提供的细胞试样的状态、使用的试剂的性质、需要的标本的完成度等原因，在该领域的迄今为止的通常的观察标本制作工序中，需要没有在其它染色领域中进行过的、如下所述的独特的作业工序。

涂抹

是将所提供的细胞试样涂敷于观察用基板(载玻片)的操作。包括直接涂敷于载玻片的方法(拉片法、推片法、离心直接涂抹法等)、在利用过滤器捕获细胞后转移至载玻片的方法(过滤器法)。前者的拉片法、推片法虽然简便，但是难以涂抹于狭窄的范围，并且由于在推片所使用的玻璃侧也附着有细胞，因此细胞密度变薄，存在观察操作时必须观察较大范围这样的问题。此外，由于后者的过滤器法无法将捕获的所有细胞转移到载玻片，因此存在细胞损失的问题，此外存在因转移操作时的压力而导致细胞形状变性这样的问题。

湿固定

是浸渍于试剂(固定液)进行固定以避免涂抹后的细胞变性的操作。在该领域中湿固定是重要的，若细胞干燥变性，则染色性发生变化，对诊断产生影响。通常，涂抹至载玻片的细胞必须在几秒内进行湿固定。因此，难以同时涂抹大量的检体。此外，在涂抹中使用设备的离心直接涂抹法、过滤器法存在下述问题：在从设备、载玻片架上取出期间、还有过滤器法的转移操作的期间会晾干。另外另外，刚刚涂抹后的细胞容易从载玻片剥离，若浸渍于固定液，则也存在导致大量细胞从载玻片剥离这样的问题。在细胞具有块状的堆叠性的情况下，就更加难以将它们保持于载玻片。为了解决该剥离的问题，也有施加防细胞剥离涂层(硅烷涂层等)的载玻片的方案，但实际上并未获得充分的效果。此外，为了同时解决剥离、干燥的问题，提出了喷射或滴下具有保湿性的固定液而涂覆细胞与载玻片的方法。然而，由于在喷射固定液的瞬间也会引起细胞的剥离，并且保湿成分(PEG等)涂覆细胞，因此存在使细胞的染色性发生变化、对诊断产生影响这样的新问题。

染色(包括溶剂更换、分离、显色)