[发明专利]抑制酶组合物的AA9溶解性多糖单加氧酶催化的失活的方法在审
申请号: | 201680050976.7 | 申请日: | 2016-09-02 |
公开(公告)号: | CN107949637A | 公开(公告)日: | 2018-04-20 |
发明(设计)人: | K·麦克法兰;A·特吉瑞安;D·阿克尔赫尔姆 | 申请(专利权)人: | 诺维信公司 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C13K1/02 |
代理公司: | 北京尚诚知识产权代理有限公司11322 | 代理人: | 顾小曼 |
地址: | 丹麦,*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 抑制 组合 aa9 溶解性 多糖 单加氧酶 催化 方法 | ||
1.一种抑制酶组合物或其组分的AA9溶解性多糖单加氧酶催化的失活的方法,所述方法包括:将选自下组的一种或多种氧化还原酶添加至该酶组合物中,该组由以下组成:过氧化氢酶、漆酶、过氧化物酶、和超氧化物歧化酶,该酶组合物包含AA9溶解性多糖单加氧酶和一种或多种酶组分,其中该一种或多种添加的氧化还原酶抑制该酶组合物的一种或多种酶组分的AA9溶解性多糖单加氧酶催化的失活。
2.如权利要求1所述的方法,其中该酶组合物进一步包含选自下组的一种或多种组分,该组由以下组成:水解酶、异构酶、连接酶、裂解酶、氧化还原酶、或转移酶。
3.如权利要求1所述的方法,其中该酶组合物进一步包含选自下组的一种或多种组分,该组由以下组成:纤维素酶、AA9多肽、半纤维素酶、纤维素诱导蛋白、酯酶、棒曲霉素、木质素分解酶、果胶酶、蛋白酶、和膨胀素。
4.如权利要求1-3中任一项所述的方法,其中该添加的氧化还原酶与该AA9溶解性多糖单加氧酶的蛋白质比率处于约1:250至约1:10,例如约1:200至约1:10、约1:150至约1:15、约1:100至约1:15、约1:75至约1:20、或约1:50至约1:25的范围内。
5.如权利要求1-4中任一项所述的方法,其中与不存在该一种或多种添加的氧化还原酶相比,在该一种或多种添加的氧化还原酶的存在下,对该AA9溶解性多糖单加氧酶催化的失活的抑制的量更高。
6.一种用于增加酶组合物的产生的方法,所述方法包括:
(a)在选自下组的一种或多种添加的氧化还原酶的存在下,发酵宿主细胞以产生该酶组合物,该组由以下组成:过氧化氢酶、漆酶、过氧化物酶、和超氧化物歧化酶,其中该酶组合物包含AA9溶解性多糖单加氧酶和一种或多种酶组分,其中该一种或多种添加的氧化还原酶抑制该酶组合物的一种或多种酶组分的AA9溶解性多糖单加氧酶催化的失活,并且其中与在该一种或多种氧化还原酶不存在下产生的酶组合物的量相比,在该一种或多种添加的氧化还原酶的存在下产生的酶组合物的量更高;并且任选地
(b)回收该酶组合物。
7.如权利要求6所述的方法,其中该宿主细胞包含相对于该宿主细胞是天然的AA9溶解性多糖单加氧酶;相对于该宿主细胞是异源的AA9溶解性多糖单加氧酶;或者相对于该宿主细胞是天然的AA9溶解性多糖单加氧酶,以及相对于该宿主细胞是异源的AA9溶解性多糖单加氧酶。
8.如权利要求5-7中任一项所述的方法,其中该酶组合物进一步包含选自下组的一种或多种组分,该组由以下组成:水解酶、异构酶、连接酶、裂解酶、氧化还原酶、或转移酶。
9.如权利要求5-7中任一项所述的方法,其中该酶组合物进一步包含选自下组的一种或多种组分,该组由以下组成:纤维素酶、AA9多肽、半纤维素酶、纤维素诱导蛋白、酯酶、棒曲霉素、木质素分解酶、果胶酶、蛋白酶、和膨胀素。
10.如权利要求5-9中任一项所述的方法,其中将该一种或多种添加的氧化还原酶添加至发酵中;该一种或多种添加的氧化还原酶是由宿主细胞重组产生的;该一种或多种添加的氧化还原酶是通过重组细胞与第二宿主细胞的共培养重组产生的;将该一种或多种添加的氧化还原酶添加至发酵中,并且该一种或多种添加的氧化还原酶是由宿主细胞重组产生的;将该一种或多种添加的氧化还原酶添加至发酵中,并且该一种或多种添加的氧化还原酶是通过重组细胞与第二宿主细胞的共培养重组产生的;该一种或多种添加的氧化还原酶是由宿主细胞重组产生的,以及通过重组细胞与第二宿主细胞的共培养重组产生的;或者将该一种或多种添加的氧化还原酶添加至发酵中,该一种或多种添加的氧化还原酶是由宿主细胞重组产生的,以及通过重组细胞与第二宿主细胞的共培养重组产生的。
11.如权利要求5-10中任一项所述的方法,其中该添加的氧化还原酶与该AA9溶解性多糖单加氧酶的蛋白质比率处于约1:250至约1:10,例如约1:200至约1:10、约1:150至约1:15、约1:100至约1:15、约1:75至约1:20、或约1:50至约1:25的范围内。
12.如权利要求5-11中任一项所述的方法,其中与不存在该一种或多种添加的氧化还原酶相比,在该一种或多种添加的氧化还原酶的存在下,对该AA9溶解性多糖单加氧酶催化的失活的抑制更高。
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