[发明专利]从血液样品中纯化核酸的组合物和方法

说明书

本文提供从血液样品中纯化核酸的系统、试剂盒、和方法。具体而言，本文提供试剂例如包含肌氨酸的溶解缓冲液，以及使用此类试剂的方法，用于从血液样品(包括干燥的血液样品)中高产率纯化核酸。还要求从全血样品中纯化核酸的系统，其含有含胍和磷酸氢二钠的裂解缓冲液。建议磁性颗粒作为捕获核酸的固体支持物。

本申请根据35 U.S.C.§119，要求2015年9月15日提交的美国临时申请系列第62/217,144号的优先权权益，本文以该申请为基础并将其全文通过引用结合于此。

技术领域

本文提供从血液样品中纯化核酸的组合物、系统、试剂盒、缓冲液和方法。具体地，本文提供从包括干燥血液样品的血液样品中高产率纯化核酸的试剂、和使用这样的试剂的方法。

背景技术

新生儿筛查是用于识别影响出生后婴儿的存活或健康的问题的试验。在美国，每年数百万新生婴儿常规地接受检查(cdc.gov网站，新生儿筛查页)。在出生后24小时到7天内用特殊的滤纸采集新生婴儿的脚跟血(其是Robert Guthrie在1963年介绍并在1970年代开始被使用的技术)，并运输到实验室进行代谢物和酶活性分析。对于大多数新生儿筛查，从全血样品中检验代谢物和酶活性。通过该筛选可检测代谢障碍、遗传紊乱或听力损失如苯丙酮尿症、镰状细胞病、和溶酶体贮积疾病(Gelb MH等，2006；Guthrie R和SusiA，1963；Giordano PC，2009；Michlitsch J等，2009；Streetly A等，2008，通过引用全文纳入本文)。最近，CDC致力于推广新生儿筛查程序如囊胞性纤维症、糖尿病和先天畸形的基因)组相关检测。越来越多的新生儿筛查实验室正在添加基于DNA的测试，包括对疾病阳性结果的验证性测试和扩展异常测试。

使用这样的方法，从干燥血液样品中提取核酸然后在分析之前进行扩增。因此，提取的基因组DNA(gDNA)的质和量必须符合PCR或其他扩增技术的要求。开发了用于提取用于下游应用的gDNA的多种方案，如基于甲醇-、基于CHELEX-100-和基于Tris-EDTA的方法。表1列出了一些用于从干燥血液和全血样品中纯化gDNA的现有的产品的例子。

这些产品包括使用离心柱和基于磁珠的纯化，其中一些适于自动化。基于磁珠的方法可减少对离心的需要。

表1.用于血液样品的基因组DNA纯化试剂盒的例子。