[发明专利]评价脑内的淀粉样蛋白β蓄积状态的多重生物标记物及其分析方法

说明书

本发明提供：以生物体来源试样中的淀粉样前体蛋白(APP)来源的Aβ和Aβ样肽作为指标的、评价脑内的Aβ蓄积状态的生物标记物及其分析方法。一种判断脑内的Aβ蓄积状态的标记物，其包括：选自由生物体来源试样中的Aβ1‑39(序列号1)水平相对于Aβ1‑42(序列号3)水平的比：Aβ1‑39/Aβ1‑42；Aβ1‑40(序列号2)水平相对于Aβ1‑42(序列号3)水平的比：Aβ1‑40/Aβ1‑42；和APP669‑711(序列号4)水平相对于Aβ1‑42(序列号3)水平的比：APP669‑711/Aβ1‑42组成的组中的至少2个比的组合。

技术领域

本发明属于脑神经科学领域和临床医学领域，涉及评价脑内的淀粉样蛋白·β肽(Aβ)蓄积状态的多重替代性生物标记物及其分析方法。更详细而言，本发明涉及以通过淀粉样前体蛋白(Amyloid precursor protein；APP)被切断而产生的Aβ和Aβ样肽的生物体来源试样中水平作为指标的评价脑内Aβ蓄积状态的多重替代性生物标记物及其分析方法。本发明的生物标记物涉及阿尔茨海默病，是用于发病前诊断、发病预防干预(优先治疗药给予等)对象者的筛选和治疗药·预防药的药效评价等的标记物。

背景技术

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease；AD)是痴呆症的主要原因，占痴呆症整体的50-60％。推断世界的痴呆症患者数(2001年2400万人以上)在2040年达到8100万人(非专利文献1)。可以认为，阿尔茨海默病的发病与淀粉样蛋白β(Aβ)有较强相关。Aβ是由作为单次跨膜蛋白的淀粉样前体蛋白(Amyloid precursor protein；APP)通过β分泌酶和γ分泌酶接受蛋白质分解而产生的。由伴随着Aβ纤维化的聚集而在脑内出现老年斑时，以此为引发而微管相关蛋白(tau protein)在神经细胞内聚集蓄积，从而导致神经功能不全、神经细胞死亡。作为其结果，可以认为，引起了认知能力的进行性降低。一直以来熟知的是，Aβ主要由40个残基(Aβ1-40)和42个残基(Aβ1-42)构成，还已知向脑脊髓液(CSF)、血液中移动。进而，近年来报道了与Aβ1-40和Aβ1-42的长度不同的Aβ样的肽还存在于CSF、血浆中(非专利文献2、3)。

可以认为，淀粉样蛋白蓄积是因AD而在脑内产生的病态生理学变化中的最早期的事件，在近些年的研究中证明了自表现出临床症状的前10年以上就开始在脑内蓄积淀粉样蛋白。因此，为了早期诊断AD，准确地检测脑内的淀粉样蛋白蓄积变得尤为重要。目前，作为检测淀粉样蛋白蓄积的方法，有淀粉样蛋白PET和CSF Aβ检查。淀粉样蛋白PET是使用与Aβ特异性结合的配体分子来对Aβ沉积进行可视化的方法，例如有使用了匹兹堡化合物B(Pittsburgh compound-B：PiB)的PiB-PET。然而，PET检查需要大量的设备，因此一次检查费用昂贵，另外，还有暴露于辐射线这样的侵袭性，因此不适合作为AD的筛选方法。另一方面，报道了CSF中Aβ1-42浓度的降低、Aβ1-42/Aβ1-40浓度比的降低、总Tau值或磷酸化Tau值的上升是有用的标记物(专利文献1：日本特开2010-19864号公报、非专利文献4)。然而，采集CSF的侵袭性也高，不适合作为AD的筛选方法。因此，筛选中优选侵袭性低且成本也便宜的血液检查。

因此，期待血中存在的Aβ1-42浓度可成为阿尔茨海默病诊断标记物，尽管多位研究者报道了血中Aβ1-42浓度与阿尔茨海默病发病之间的相关性，但并未得到一致的结果(非专利文献4)。

然而，近些年，作为反映脑内淀粉样蛋白蓄积状态的有希望的血液标记物报道了APP669-711/Aβ1-42的比(非专利文献5)。非专利文献5显示出APP669-711/Aβ1-42的比与由PiB-PET得到的PiB累积度具有较强的相关性。进而，利用PiB阳性和PiB阴性的组进行ROC分析，结果显示出APP669-711/Aβ1-42的比是能够精度良好地判定PiB阳性者和PiB阴性者的标记物。