[发明专利]多肽变体在审

专利信息
申请号: 201680055206.1 申请日: 2016-10-14
公开(公告)号: CN108291212A 公开(公告)日: 2018-07-17
发明(设计)人: L.H.奥斯特加德;G.J.阿贝尔;D.M.K.克利特加德;A.H.约翰森 申请(专利权)人: 诺维信公司
主分类号: C12N9/16 分类号: C12N9/16
代理公司: 北京市柳沈律师事务所 11105 代理人: 凃滔;张文辉
地址: 丹麦*** 国省代码: 丹麦;DK
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摘要:
搜索关键词: 变体 多核苷酸 多肽变体 核酸构建体 宿主细胞
【权利要求书】:

1.一种DNA酶变体,其包括在对应于以下位置的一个或多个位置处的取代:SEQ ID NO:1的4、17、19、19、19、36、38、39、39、40、40、41、41、45、51、53、53、54、55、57、64、64、64、64、64、64、66、67、67、68、68、68、68、69、69、69、69、69、69、69、69、70、70、70、71、72、74、74、75、77、82、82、83、83、83、83、83、84、85、85、85、86、86、86、88、88、91、99、101、105、105、105、105、106、115、116、135、136、138、138、138、138、139、140、140、140、141、151、152、152、152、152、153、154、162、163、164、166、166、168、169、169、173、173、173、182、183、184、185、186、189、189、212、212和215,其中该变体与SEQ ID NO:1中显示的多肽具有至少80%的序列一致性,其中该变体具有DNA酶活性,并且其中与SEQ ID NO 1相比,该变体具有改进的稳定性。

2.如权利要求1所述的DNA酶变体,其中该变体包括选自下组的一个或多个取代,该组由以下组成:N4E、L17E、T19A、T19G、T19I、K36P、Q38P、S39V、S39R、A40P、A40H、L41T、L41H、V45H、L51G、K53T、K53P、G54P、A55P、N57H、E64A、E64Q、E64R、E64T、E64I、E64S、T66H、K67A、K67T、N68V、N68P、N68I、N68H、S69A、S69D、S69E、S69K、S69L、S69W、S69Y、S69Q、N70T、N70H、N70G、R71T、D72E、S74H、S74G、G75I、N77T、K82P、K82I、D83T、D83P、D83I、D83H、D83G、P84H、Q85T、Q85P、Q85H、K86T、K86P、K86H、G88P、G88H、A91P、W99T、A101W、K105E、K105N、K105T、K105D、S106T、S115T、L116I、Q135L、G136L、V138I、V138L、V138P、V138Q、L139A、N140R、N140L、N140A、G141L、F151R、D152Y、D152L、D152I、D152A、P153E、S154R、T162R、W163E、F164R、I166Y、I166R、K168N、F169R、F169E、A173I、A173R、A173T、S182R、N183E、D184I、K185Y、S186I、D189G、D189H、K212G、K212P和K215I,其中这些位置对应于SEQ ID NO 1的位置。

3.根据权利要求1或2所述的DNA酶变体,其中与在SEQ ID NO:1中显示的多肽相比,该DNA酶变体具有至少为1.1;1.5;2.0;3.0、3.5、4.0、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10的改进因子(IF)。

4.如权利要求1-3中任一项所述的变体,其中该变体与SEQ ID NO:1的成熟多肽具有至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%序列一致性。

5.如权利要求1-4中任一项所述的变体,其中与SEQ ID NO:1相比,改变的总数目是1-20个,例如1-10个和1-5个,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个改变。

6.一种组合物,其包括根据权利要求1至5中任一项所述的DNA酶变体,其中该组合物包括:

a)至少0.002ppm DNA酶变体,任选地

b)2wt%至60wt%的至少一种表面活性剂,任选地

c)5wt%至50wt%的至少一种助洗剂,和/或任选地至少一种另外的酶。

7.如权利要求6所述的组合物,其中该组合物是洗涤剂组合物。

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