[发明专利]可溶性分选酶A有效
申请号: | 201680055734.7 | 申请日: | 2016-09-22 |
公开(公告)号: | CN108138158B | 公开(公告)日: | 2021-11-09 |
发明(设计)人: | M·伯尼茨-杜拉特;M·沙特 | 申请(专利权)人: | 豪夫迈·罗氏有限公司 |
主分类号: | C12N9/52 | 分类号: | C12N9/52 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 史文静;黄革生 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 可溶性 分选 | ||
1.由SEQ ID NO:38组成的多肽。
2.根据权利要求1所述的多肽,其另外包含在其N-或C-末端的标签,所述标签或者直接缀合或者经由插入的接头缀合。
3.根据权利要求1或2中任一项所述的多肽用于将包含氨基酸序列LPXTG或LPXTA的第一多肽与第二多肽缀合的用途,所述第二多肽包含寡聚甘氨酸或寡聚丙氨酸或半胱氨酸氨基酸残基,随后是在其N-末端的二或三个甘氨酸或丙氨酸氨基酸残基,其中氨基酸序列LPXTG如SEQ ID NO:1所示,其中X能够是任何氨基酸残基;且氨基酸序列LPXTA如SEQ IDNO:41所示,其中X能够是任何氨基酸残基。
4.一种酶促产生多肽的方法,包括以下步骤
-孵育
i)第一多肽,其包含氨基酸序列LPXTG或LPXTA,其中氨基酸序列LPXTG如SEQ ID NO:1所示,其中X能够是任何氨基酸残基;且氨基酸序列LPXTA如SEQ ID NO:41所示,其中X能够是任何氨基酸残基,
ii)第二多肽,其包含寡聚甘氨酸、或寡聚丙氨酸或半胱氨酸氨基酸残基,随后是在其N-末端的二或三个甘氨酸或丙氨酸氨基酸残基,和
iii)根据权利要求1或2中任一项所述的多肽,
并且因而产生多肽。
5.根据权利要求4所述的方法,其中所述方法用于两种多肽的酶促缀合。
6.根据权利要求4或5所述的方法,其中所述第二多肽在其N-末端具有氨基酸序列GGG、AAA、CGG、CAA、KGG或KAA。
7.根据权利要求4或5所述的方法,其中所述第一多肽在其C-末端包含氨基酸序列LPXTG或LPXTA,其中氨基酸序列LPXTG如SEQ ID NO:1所示,其中X能够是任何氨基酸残基;且氨基酸序列LPXTA如SEQ ID NO:41所示,其中X能够是任何氨基酸残基。
8.根据权利要求4或5所述的方法,其中所述第一多肽在其C-末端包含SEQ ID NO:04所示的氨基酸序列LPETG或SEQ ID NO:42所示的氨基酸序列LPETA。
9.根据权利要求4或5所述的方法,其中所述第二多肽选自抗体可变结构域、抗体重链Fab片段、抗体Fc区域和标签;和/或所述第一多肽是包含氨基酸序列LPXTG或LPXTA、接头以及非-分选酶基序部分的肽,其中氨基酸序列LPXTG如SEQ ID NO:1所示,其中X能够是任何氨基酸残基;且氨基酸序列LPXTA如SEQ ID NO:41所示,其中X能够是任何氨基酸残基。
10.根据权利要求6所述的方法,其中所述第一多肽在其C-末端包含氨基酸序列LPXTG或LPXTA,其中氨基酸序列LPXTG如SEQ ID NO:1所示,其中X能够是任何氨基酸残基;且氨基酸序列LPXTA如SEQ ID NO:41所示,其中X能够是任何氨基酸残基。
11.根据权利要求6所述的方法,其中所述第一多肽在其C-末端包含SEQ ID NO:04所示的氨基酸序列LPETG或SEQ ID NO:42所示的氨基酸序列LPETA。
12.根据权利要求6所述的方法,其中所述第二多肽选自抗体可变结构域、抗体重链Fab片段、抗体Fc区域和标签;和/或所述第一多肽是包含氨基酸序列LPXTG或LPXTA、接头以及非-分选酶基序部分的肽,其中氨基酸序列LPXTG如SEQ ID NO:1所示,其中X能够是任何氨基酸残基;且氨基酸序列LPXTA如SEQ ID NO:41所示,其中X能够是任何氨基酸残基。
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