[发明专利]通过使用氢的二硫化物的酶促氢解制备硫醇的方法

权利要求书

1.制备式R-SH的硫醇的方法，其至少包括以下步骤：

a)制备混合物，其包含：

1)式R-S-S-R'的二硫化物，

2)催化量的带有巯基的氨基酸或含巯基的肽，

3)催化量的用于催化还原反应的酶，所述还原反应是在两当量的所述带有巯基的氨基酸或所述含巯基的肽之间产生的二硫键的还原反应，

4)催化量的用于催化氢还原反应的酶，

5)催化量的两种用于催化还原反应和脱氢反应的酶的共同辅因子，

b)与催化量的氢脱氢酶一起加入氢气，

c)进行酶促反应，

d)回收式R-SH的硫醇和式R'-SH的硫醇，

e)任选地分离和任选地纯化式R-SH的硫醇和/或式R'-SH的硫醇；

其中R和R'是相同或不同的，彼此独立地表示包含1至20个碳原子的线性，支化或环状的烃-基基团，所述链是饱和的或带有一个或多个呈双键或三键形式的不饱和度，R和R'也能一起并且与携带它们的硫原子一起形成包含4至22个原子的环状分子。

2.根据权利要求1所述的方法，其包括至少以下步骤：

a')制备混合物，所述混合物包含：

·式R-S-S-R'的二硫化物，

·催化量的带有巯基的氨基酸或含巯基的肽，

·催化量的对应于所述带有巯基的氨基酸或含有所述含巯基的肽的还原酶，

•催化量的NADPH，

b')与催化量的氢脱氢酶一起加入氢气，

c')进行酶促反应，

d')回收式R-SH的硫醇和式R'-SH的硫醇，

e')分离和任选纯化式R-SH的硫醇和/或式R'-SH的硫醇。

3.根据权利要求1或2的方法，其中R和R'是相同或不同的，彼此独立地表示包含1至20个碳原子的线性，支化或环状的烃-基基团，所述链是饱和的或带有一个或多个呈双键或三键形式的不饱和度，R和R'也能一起并且与携带它们的硫原子一起形成包含5至10个原子的环状分子。

4.根据权利要求1或2的方法，其中基团R和R'，是相同或不同的，彼此独立地选自线性或支化，饱和或不饱和的烷基，环烷基，芳基，烷芳基或芳烷基，其包含1至20个碳原子，并且任选通过一个或多个选自醇，醛，酮，酸，酰胺，腈或酯官能团或带有硫，磷，硅或卤素的官能团进行官能化。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其中式R-S-S-R'的二硫化物是二甲基二硫醚。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其中带有巯基的氨基酸或带有巯基的肽选自半胱氨酸，高半胱氨酸，谷胱甘肽和硫氧还蛋白。

7.根据权利要求1或2所述的方法，其中通过鼓泡将所述氢引入到反应介质中。

8.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述反应的pH在6-8.5之间。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述反应的pH在7.0-8.0之间。

10.根据权利要求1或2所述的方法，其中在整个所述反应中，所述氢/二硫化物摩尔比为0.01-100之间。

11.根据权利要求10所述的方法，其中在整个所述反应中，所述氢/二硫化物摩尔比为1-20之间。