[发明专利]免疫学测定器件

说明书

本发明提供一种免疫学测定器件，其不用利用多孔体来构成移动样本的流路，另外，不会使流路长度过长且复杂，可以对流路自身赋予强的毛细管力而使样本及标记物可靠地移动及混合，即使增大标记物的粒径，也不用担心在流路中产生堵塞，可以可靠并且有效地提高标记物的观察性、信号强度。本发明包含具备进行基于抗原抗体反应的免疫学测定的样本所移动的流路的微流体器件(1)，具备标记试剂供给部(4)，其配设于流路的上游部，对样本进行标记；和检测流路(8)，其配设于标记试剂供给部(4)的下游，测定样本的抗原抗体反应，在标记试剂供给部(4)中，配置有具有利用抗原抗体反应来标记样本的、固相化有抗原或抗体的标记物的标记试剂。

技术领域

本发明涉及利用抗原抗体反应的免疫学测定中所用的免疫学测定器件，特别涉及包含具备成为免疫学测定对象的样本所移动的流路的微流体器件的免疫学测定器件。

背景技术

一般而言，已知有在利用抗原抗体反应的免疫学测定中所用的免疫学测定器件。作为该种免疫学测定器件，例如已知有被称作免疫层析器件的器件。所谓免疫层析器件，是可以进行利用了抗原抗体反应的免疫学测定的器件，主要用于细菌、病毒等病原体的检测。

具体而言，免疫层析器件中，通过向由预先浸渗有标记试剂的玻璃纤维等无纺布、纤维构成的结合垫滴下例如血液或体液等含有待分析物的样本，所述标记试剂是将与样本中所含的待分析物(抗原或抗体)反应的抗体或抗原固相化于标记物的状态，则如果在样本中含有抗原(或抗体)，该抗原就会因抗原抗体反应而与预先浸渗于结合垫中的标记试剂形成复合体而被标记，该复合体从与结合垫抵接的由硝基纤维素发泡体构成的膜中移动过去，由以线状配置于上游的样本捕捉部分的包含捕捉抗体的捕捉试剂捕捉，使得标记物以能够观察的线状(line状)显色。

由此，可以根据标记物的浓度、线的位置(种类)来检测、测定样本的有无或浓度、种类等。作为该种器件，被作为流感等传染病或过敏用的诊断试剂盒、市售的妊娠检查试剂盒广泛地使用。

此处，此种流感的检查试剂盒等中所使用的免疫层析器件优选操作容易且可以一次性使用的简易的构成的器件，作为为了产生抗原抗体反应而一边将样本及标记试剂混合一边使之移动的成为流路的介质，例如使用由硝基纤维素发泡体等多孔体构成的膜，利用基于多孔体的毛细管现象的毛细管力，可以无需来自外部的泵力地使样本及标记试剂移动、行进。

另外，在作为样本的流路使用硝基纤维素等发泡体的免疫层析器件中，为了排除标记物堵塞于成为样本的流路的发泡体的多孔部分的可能性，需要使标记物为与多孔体的孔(间隔)相比足够小的粒径。例如，硝基纤维素发泡体的平均孔径约为10μm左右，如果也考虑孔径有波动的发泡体的特性等，则标记物的大小需要最大为400nm以下，优选设为40nm左右。因此，免疫层析器件中，使用粒径为40nm以下的金胶体等作为标记物。

然而，在将此种粒径40nm以下的金胶体作为标记物使用的情况下，抗原抗体反应的结果是，即使标记试剂由包含抗原或抗体的捕捉试剂捕捉，由于标记物的粒径小，因此也不会使器件的样本捕捉部分充分地显色，存在有观察性(信号强度)降低(恶化)的问题。特别是在病毒等待分析物的浓度低等时，不能使样本捕捉部分以能够观察的程度显色，即使在样本中含有抗原，显色也不充分，因此判定为阴性，例如存在有看漏流感的初期感染的情况。因此，在使用免疫层析器件的情况下，需要采集包含高浓度的待分析物的样本，存在有对被测者的侵袭和伴随有由此造成的强烈的疼痛的问题。

因而，为了解决此种免疫层析器件的问题，例如提出过专利文献1、专利文献2中公开的那样的方案。

专利文献1中提出，作为免疫层析器件的标记物，使用平均粒径为50～150nm的微小粒径的金胶体粒子，并且使金胶体粒子的表面担载铂。这是因为，金胶体具有红色的显色性，通过使粒子表面担载铂，可以利用铂膜所具有的黑色的对比，而与通常的金胶体相比提高观察性、信号强度，可以提高检测线的观察性。