[发明专利]凝血酶-抗凝血酶复合体的测定试剂及测定方法

说明书

本发明提供一种试剂，其特征在于，其是用于利用乳胶凝集法对来自被试者的血液试样中的凝血酶‑抗凝血酶复合体(TAT)进行测定的试剂，该试剂包含聚阳离子。由此，可以避免肝素的影响而准确地测定TAT。

技术领域

本发明涉及用于测定试样中的凝血酶(T)-抗凝血酶(AT)复合体(TAT)的试剂和方法。

背景技术

凝血酶-抗凝血酶复合体(TAT)是在进行血液凝固时在血液中所产生的蛋白复合体，血液中的TAT的定量对于弥漫性血管内凝血(DIC)等血栓形成的诊断有用。然而，TAT的存在量为游离抗凝血酶的存在量的约十万分之一，因此不容易测定。

现在，主流的TAT定量法包括使用采用了西门子公司的Enzygnost(注册商标)TATmicro等酶免疫测定法(ELISA)的试剂盒及采用了LSI MEDIENCE公司的STACIA(注册商标)CLEIA TAT等化学发光酶免疫测定法(CLEIA)的试剂盒的方法，但均为需要固相-液相分离(B/F分离)的测定法，需要烦杂的清洗作业，并且需要手工作业或专用设备。

在专利文献1～4中报道了使用不需要B/F分离的乳胶凝集法的试剂体系，但均是通过利用缓冲液稀释在体外合成的TAT而制作的样品的测定，并且没有涉及使用乳胶凝集法能够对人体标本中的TAT进行准确浓度测定的试剂的报道。另外，这些文献均依赖抗体的特异性来构建TAT测定试剂，或者利用添加剂来避免由该交叉反应性带来的影响。专利文献5公开了有关基于使用不具有交叉反应性的抗体的夹心测定法的TAT测定，但是，因为要在临床上进行利用，所以灵敏度不够。

因此，在测定简便的乳胶凝集法中，要求高灵敏度-高精度地测定活体试样中的TAT的试剂及方法。

本发明人等报道了能够使用不需要B/F分离的乳胶凝集法而对人标本中的TAT准确地进行浓度测定的试剂(专利文献6、7)，但是为了临床应用，还有进一步改善的余地。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2001－289850号公报

专利文献2：日本特开2001－221800号公报

专利文献3：日本特开平7－238099号公报

专利文献4：日本特开2002－316999号公报

专利文献5：日本特开平3－48158号公报

专利文献6：日本特愿2015－074168号

专利文献7：日本特愿2015－074173号

发明内容

发明要解决的课题

如图1记载的那样，在基于乳胶凝集法的TAT的测定中，使用与抗凝血酶侧结合来识别TAT的抗体及与凝血酶侧结合来识别TAT的抗体两种抗体。而且，在原理上，仅在有TAT存在时两抗体结合而引起乳胶凝集，能够进行TAT的定量。