[发明专利]产生单克隆抗体、造血干细胞的方法和组合物以及利用所述抗体和造血干细胞的方法

说明书

发现和产生可以用于鉴定和/或分离造血干细胞(HSC)，例如具有高重建潜能的HSC的抗体的方法和组合物。还提供利用HSC或遗传修饰的HSC，例如具有高重建潜能的HSC和/或遗传修饰的HSC治疗患有血液病症或遗传病症的患者、患有心血管病症的患者、从伤口恢复的患者或者从化疗或辐射暴露恢复的患者的方法和组合物。

根据35U.S.C.§119(e)，本申请要求于2015年11月3日提交的美国临时申请第62/250,424号的权益，将所述申请通过引用整体并入本文。

本公开总体上涉及生物化学、分子生物学、细胞生物学和再生医学领域。本公开提供发现和制备可用于鉴定和分离造血干细胞(HSC)，例如具有高重建潜能的HSC的抗体的方法和组合物。本公开还提供利用造血干细胞，例如具有高重建潜能的HSC治疗患有血液疾病、病症或病况的患者或者从化疗或放疗恢复的患者的方法和组合物。本公开还提供利用HSC治疗心血管病症的方法和组合物。本公开还提供利用HSC治疗伤口并促进伤口愈合的方法和组合物。本公开还提供在基因疗法中使用HSC的方法和组合物。

以下仅作为背景信息提供，并且不应被视为承认所讨论的任何主题或所提及的任何参考文献是本公开的现有技术。将本文提及的所有出版物和专利申请通过引用并入，其程度如同将各单独的出版物或专利申请具体地且单独地指示为通过引用并入一样。

造血干细胞(HSC)是具有终生自我更新和产生所有血细胞谱系能力的单细胞。利用自体和同种异体造血细胞移植物，HSC在成功造血重建中发挥重要作用。Weissman IL，Shizuru JA(2008)The origin of the identification and isolation ofhematopoietic stem cells，and their ability to induce donor-specifictransplantation tolerance and treat autoimune diseases，Blood 112(9)：3543-53，在此将其通过引用并入。造血细胞移植是治疗血液疾病、病症或病况(例如地中海贫血、镰状细胞病、白血病、淋巴瘤、骨髓瘤)以及使之从化疗和高剂量辐射中解脱的有前景的治疗方法。造血细胞移植物的潜在缺点是它们含有造血细胞的混合物，包括具有不同重建潜能的HSC和其他非HSC。这可能导致由该过程产生的并发症和副作用。例如，由于不能从患者其他可能的患病细胞中分离具有高重建潜能的HSC，因此自体造血细胞移植通常不是治疗选择。代替的是使用同种异体捐献。通过使用同种异体细胞，患者可以避免将其自己自体捐献的患病细胞重新引入其系统中，但是存在诸如移植物抗宿主疾病的并发症的风险。即使在同种异体捐献中，可以通过识别和仅移植最有可能重建患者的健康血细胞群的细胞来减少并发症。因此，需要鉴定和分离用于诸如造血细胞移植的治疗中的HSC-特别是具有高重建潜能的HSC。

遗传修饰的HSC还可以在遗传疾病、病症或病况，特别是血液遗传疾病、病症或病况的治疗中提供有希望的治疗方法。由于HSC的独特特性(例如自我更新和分化成多种细胞的能力)，它们是将遗传修复引入患者的理想候选者。在基因疗法中，利用已知技术对获自罹患遗传疾病、病症或病况的患者的细胞进行遗传修饰以插入治疗性基因(整合进宿主细胞的基因组中或者作为外部附加体或质粒)。例如，治疗性基因可以使细胞表达蛋白质、干扰蛋白质表达或者校正基因突变。基因疗法的常用方法涉及利用载体将聚合物(如DNA)插入基因组中，从而用功能性的治疗性基因替换突变的或其他功能失调的基因。然后可以将具有遗传修饰的细胞移植回患者中，并且所述遗传修饰的细胞将表达治疗性基因，从而治疗疾病、病症或病况。此类基因疗法的有效性与遗传修饰的细胞的原始性有关。当前方法的缺点可能与多种细胞快速分裂的性质和短的寿命有关，这阻碍了基因疗法获得长期益处和/或需要患者经受多种治疗。