[发明专利]用于检测原代细胞群体针对药物或药物组合的细胞响应性的离体方法

权利要求书

1.用于检测原代肿瘤细胞群体针对药物或药物组合的细胞响应性的离体方法，所述方法是用于非疾病诊断目的，并且包括：

i)将来自受试者的选自外周血(PB)或骨髓(BN)或淋巴结(LN)的全样品进行分离工序，以分离不含白细胞的人工环境(AE)，所述人工环境由血浆级分、红细胞级分或其组合组成，

ii)将在前述步骤中得到的不含白细胞的AE与原代肿瘤细胞群体混合，

iii)向步骤ii)的混合物中添加至少一种检测的药物，

iv)将步骤iii)中得到的混合物孵育2小时至14天，以允许检测的药物对所述原代肿瘤细胞群体发挥其可能具有的任何活性，

v)在存在或不存在检测的药物的条件下，评估所述原代肿瘤细胞群体的存活力和/或增殖，

vi)产生在存在和不存在检测的药物的条件下进行的评估之间关于原代肿瘤细胞群体的存活力和/或增殖的比较数据，并且使所得到的数据与指示用于降低/提高所述原代肿瘤细胞群体的存活力和/或增殖的药物活性的值相关联。

2.权利要求1所述的离体方法，其中所述血浆级分与所述红细胞级分的组合是以1:1的比例。

3.权利要求1-2中任一项所述的离体方法，其中所述全样品来自人来源。

4.权利要求1-2中任一项所述的离体方法，其中所述不含白细胞的AE来自健康的捐献者或来自已经患有或患有癌症的捐献者。

5.权利要求1-2中任一项所述的离体方法，其中从一些捐献者获得所述不含白细胞的AE并且汇集在一起，然后与所述原代肿瘤细胞群体和/或所述检测的药物混合。

6.权利要求1-2中任一项所述的离体方法，其中所述不含白细胞的AE获得自患有与获得所述原代肿瘤细胞群体的患者相同的疾病的一名或多名捐献者，或获得自患有与提供所述原代肿瘤细胞群体的患者不同的疾病的一名或多名捐献者，或者，不含白细胞的AE获得自健康的捐献者。

7.权利要求6所述的离体方法，其中所述不含白细胞的AE获得自提供所述原代肿瘤细胞群体的同一受试者。

8.权利要求1-2中任一项所述的离体方法，其中孵育混合物还包括至少一种可溶性因子和/或至少一种另外的在体内肿瘤微环境细胞群体中发现的细胞类型的细胞群体。

9.权利要求8所述的离体方法，其中所述至少一种可溶性因子是选自下述的肿瘤微环境的非细胞成分：肿瘤来源的外来体，信号传导分子，生长因子，趋化因子，细胞因子，白介素和来源于肿瘤或非肿瘤细胞的任意可溶性分子。

10.权利要求9所述的离体方法，其中所述至少一种可溶性因子选自：白介素(IL)-2，IL-4，IL-6，IL-8，IL-10，IL-13，IL-15，IL-21，可溶性分化簇(sCD)40配体，免疫球蛋白(Ig)M，CpG，包含未甲基化CpG二核苷酸基序的短的合成的单链DNA分子，B细胞激活因子(BAFF)和增殖诱导配体(APRIL)。

11.权利要求8所述的离体方法，其中所述至少一种另外的细胞群体选自：成纤维样网状细胞，滋养细胞，间质干细胞，滤泡树枝状细胞，内皮细胞，周细胞，和来源于原代基质细胞的细胞系。

12.权利要求11所述的离体方法，其中来源于原代基质细胞的细胞系选自：HS-5，HS27a，UE6E7T-2，NK-Tert，HMEC-1，KUSA-H1，M210B4，ST-2和KUM-4。

13.权利要求8所述的离体方法，其中所述至少一种可溶性因子和/或另外的细胞群体来自人之外的其他物种。

14.权利要求1-2中任一项所述的离体方法，其中所述原代肿瘤细胞群体是在其使用前新鲜提取的或是之前低温保存的并且在使用前解冻。