[发明专利]针对血管生成因子的高度有效的单克隆抗体

说明书

本发明涉及针对血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素2(Ang‑2)的中和单克隆抗体、包含其的药物组合物以及包括将此类药物组合物施用至患者的治疗方法。

相关申请的交叉引用

本申请要求2015年9月14日提交的美国临时申请第62/218,226号的优先权，其全部内容通过引用并入本文。

发明领域

本发明一般地涉及单克隆抗体(mAb)的组合和用于开发新的生物制品的重组DNA技术，并且更具体地例如涉及结合并中和血管内皮生长因子或血管生成素-2的单克隆抗体的产生。

发明背景

血管生成是从现有脉管系统形成新血管的过程。血管生成不仅是正常发育和组织再生所必需的，也是尺寸超过2mm-3mm的肿瘤生长所必需的(在N.Vasudev等人，Angiogenesis 17：471-494，2014中综述)，以为肿瘤供应氧和营养。人们因此提出，抑制血管生成可以抑制肿瘤生长(J.Folkman，N Eng J Med 285：1182-1186，1971)。异常血管生成还参与其他病理学状况，包括年龄相关性黄斑变性、糖尿病性视网膜病和类风湿性关节炎。

大量细胞因子促进血管生成，包括血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子1和2(FGF1和FGF2)、血小板衍生的生长因子(PDGF)、胎盘生长因子(PGF或PIGF)、胰岛素样生长因子(IGF)、血管生成素1和2(Ang-1和Ang-2)、以及肝细胞生长因子(HGF)(在R.Gacche等人，ProgBiophys Mol Biol 113：333-354，2013中综述)。由VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C和VEGF-D组成的VEGF同源生长因子家族通过介导内皮细胞增殖、迁移和管形成发挥重要作用(在T.Veikkola等人，Semin Cancer Biol 9：211-220，1999中综述)。其中，VEGF-A被研究的最彻底并且在正常血管生成和肿瘤血管生成中起关键作用；在本文中不具有字母标识符的VEGF应当指VEGF-A。

VEGF(即VEGF-A)是由两个相同的23kDa单体组成的同二聚体糖蛋白。存在数种可变剪接的人VEGF同种型，包括VEGF₁₂₁、VEGF₁₆₅、VEGF₁₈₉、和VEGF₂₀₆(N.Ferrara等人，NatureMed 9：669-676，2003)。其中VEGF₁₆₅是最丰富的并且是促有丝分裂的同种型，并且对应于23kDa亚基。VEGF₁₈₉和VEGF₂₀₆结合肝素并因此结合细胞外基质；VEGF₁₆₅是可扩散的(VEGF的结构和生物学在Q.T.Ho等人，Int J Biochem Cell Biol 39：1349-1357，2007中综述)。VEGF家族成员结合三种酪氨酸激酶细胞受体：VEGFR1(Flt-1)、VEGFR2(Flk-1；KDR)和VEGFR3，VEGF-A主要通过VEGFR2进行信号传导(在C.Fontanella等人，Ann Transl Med 2：123，2014中综述)，所以本文中VEGFR2将也被称为VEGFR。VEGF与VEGFR2的结合导致受体二聚化、自磷酸化以及MEK-MAP和PI3K-AKT信号传导途径的活化，引起细胞增殖和内皮细胞存活。