[发明专利]用于改善信号检测的化合物和系统有效
申请号: | 201680067781.3 | 申请日: | 2016-11-18 |
公开(公告)号: | CN108350487B | 公开(公告)日: | 2022-05-27 |
发明(设计)人: | S·岳;A·费多洛夫;G·沈;S·吴 | 申请(专利权)人: | 加利福尼亚太平洋生物科学股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6816 | 分类号: | C12Q1/6816;C12Q1/682;C12Q1/6869;G01N21/17;C09B29/00 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 王颖;江磊 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 改善 信号 检测 化合物 系统 | ||
1.一种改进信号检测测定的方法,所述方法包括:
提供包含荧光或发荧光反应物和未标记的反应物的反应混合物;
向所述反应混合物中添加信号检测测定SDA增强剂,其中SDA增强剂包含SDA增强部分和亲水部分,SDA增强剂选自下组:
用激发照射对反应混合物进行光照;和
检测来自光照反应的发射信号,其中与不存在SDA增强剂的光照反应混合物相比,SDA增强剂导致信噪比SNR增加,光保护增强,或两者。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述未标记的反应物被固定在反应位点。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述反应位点在零模式波导内。
4.如权利要求1-3中任一项所述的方法,所述方法还包括在照射反应混合物时监测荧光或发荧光反应物与未标记反应物之间的反应的步骤。
5.如权利要求1-3中任一项所述的方法,其特征在于,所述光照反应是碱基延伸反应。
6.如权利要求1-3中任一项所述的方法,其特征在于,所述未标记的反应物是酶。
7.如权利要求6所述的方法,其特征在于,所述酶是聚合酶、解旋酶、外切核酸酶、核糖体或连接酶。
8.如权利要求1-3中任一项所述的方法,其特征在于,所述反应混合物还包含模板核酸分子。
9.如权利要求1-3中任一项所述的方法,其特征在于,所述荧光或发荧光反应物包含核苷多磷酸盐或其类似物。
10.如权利要求1-3中任一项所述的方法,其特征在于,SDA增强部分还包含将SDA增强部分与亲水部分连接的接头。
11.如权利要求10所述的方法,其特征在于,接头包含至少两个碳的烷基链。
12.如权利要求10所述的方法,其特征在于,接头包含聚乙二醇链。
13.如权利要求1-3中任一项所述的方法,其特征在于,SDA增强剂导致以下任何结果或它们的组合:(i)增加光学信号,(ii)降低背景噪声,(iii)减轻对未标记的反应物的光致损伤PID,和(iv)减少荧光或发荧光反应物的闪烁或光漂白,其中(i)至(iv)是与不存在SDA增强剂时的光照反应混合物相比较的。
14.如权利要求1至3中任一项所述的方法,其特征在于,与不存在SDA增强剂的光照反应混合物相比,SDA增强剂导致SNR增加和光保护增强。
15.如权利要求1至3中任一项所述的方法,其特征在于,所述信号检测测定是光照测序反应,其中所述测序反应的准确度与不存在SDA增强剂的光照测序反应相比得到增加。
16.如权利要求15所述的方法,其特征在于,所述反应混合物包含:聚合酶,模板核酸,以及荧光或发荧光核苷酸或核苷酸类似物。
17.如权利要求16所述的方法,所述方法还包括在照射反应混合物时监测聚合酶与荧光或发荧光核苷酸或核苷酸类似物之间的反应的步骤。
18.如权利要求16或17中任一项所述的方法,其特征在于,所述光照测序反应是碱基延伸反应。
19.如权利要求16或17中任一项所述的方法,其特征在于,所述聚合酶被限制在零模式波导内。
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