[发明专利]环状三肽用于改善细胞能量代谢的用途

说明书

本发明涉及包含再生致育蛋白β与卵母细胞整联蛋白的结合位点的三肽的环肽用于改善细胞能量代谢的用途。更具体地，本发明涉及包含三肽FEEc的环肽用于在医学辅助生育(MAP)方案的背景下刺激配子或胚胎细胞的能量代谢的用途，特别是促进卵母细胞的体外成熟、受精率和出生率。

本发明涉及医学辅助生育(MAP)的领域，且更具体地涉及在其中希望刺激细胞的线粒体活性或更一般地能量活性的所有医学、兽医学或其它应用，特别是在包括细胞培养或离体细胞维持的步骤的方案中。

超过15％的夫妇在他们的生殖寿命中具有对医学辅助生育的依赖。当精子受损时，为了得到受精经常求助于显微注射技术。该技术对于卵母细胞而言是非常侵袭性的。此外，在使用正常精子的体外受精(IVF)过程中，经常遇到3-5％的无法解释的受精失败。

在先前的专利申请(WO 2005/051799 A2)中，发明人的团队描述了具有在两个末端半胱氨酸之间的环化连接的式C-S-F-E-E-C(SEQ ID No.1)的环状三肽(Phe,Ac Glu,AcGlu)(FEEc)以及它的增加人配子的受精能力的作用。在不同的动物物种中存在所述分子的等同物，它们具有相同的性质，并且也被描述在所述文件中。

跟随他们的研究，发明人已经证实，FEEc分子对精子具有影响(下面的实施例1)。具体地，它会改善精子运动的参数，如通过CASA(Computer Aided Sperm Analysis，计算机辅助的精子分析)所分析的。因而，例如，头部的直线速度和侧向摆动(lateral tiring)的振幅分别增加了7％和8％(P0.05和P0.002)(实施例1)。这导致超活化的精子的百分比的接近30％的增加(P0.009)。这些超活化的精子是授精精子，为了使所述精子增加它的前进速度，在逻辑上认为它会增加它的ATP消耗，或至少增强它的能量代谢，因为它的运动通过使动力蛋白臂结合至在鞭毛轴丝附近的小管而建立。动力蛋白是ATP酶。通过研究暴露于FEEc的精子的线粒体代谢，发明人已经提出以下假设：所述FEEc诱导线粒体膜电位的增加，从而证实线粒体的ATP合成的增加或减少的消耗。因而，FEEc会改善线粒体能量代谢，或更一般地改善精子的细胞能量代谢，无论通过改善ATP生产，还是通过定量配给细胞对它的使用。

因此，本发明一般地涉及包含三肽(其再生致育蛋白β与卵母细胞整联蛋白的结合位点)的环肽或式EEP(SEQ ID No.2)的三肽的用途，其作为用于改善线粒体活性或更一般地用于改善细胞能量代谢的药物的用途。在本文中举例说明了这样的肽在两种不同细胞类型(即精子和卵母细胞)上和在多细胞胚胎生物的发育上的应用。呈现在实验部分中的结果支持能够在其中希望改善细胞能量代谢的其它应用中使用该肽的事实。具体地，该肽可以用于改善细胞培养物、特别是淋巴细胞的收率。在一个特定实施方案中，将所述肽载体化，也就是说与试剂、分子、组合物或任意其它类型的促进它进入细胞中的载体组合施用。更一般而言，所述载体化通过将它与载体组合用于调节和控制活性成分向靶标的分布。

在前述内容中，“包含三肽(其再生致育蛋白β与卵母细胞整联蛋白的结合位点)的环肽”对应于在上述专利申请WO 2005/051799 A2中描述的肽。如在该在先申请中、特别是在表1中提及的，所述三肽随物种变化。通过本领域技术人员已知的任何方式，特别是借助于位于所述三肽的任一侧上的两个半胱氨酸残基，可以将它环化。通常，认为在申请WO2005/051799 A2中描述的所有变体对应于用于本发明的目的的“包含三肽(其形成致育蛋白β与卵母细胞整联蛋白的结合位点)的环肽”的定义。为了便利本文的阅读，该环肽以及含有它作为活性成分的药物将在本文中用式“FEEc”表示。本领域技术人员将完全理解，该表示法也涵盖可以用在除了人类以外的物种中的形式，例如，将用在牛科动物中的TDE环状三肽。

通过阅读下面的发明详述以及实施例将理解，本发明的范围不限于医学辅助生育应用，并且它在许多其它领域中开启了真实前景。因而，本发明更一般地涉及FEEc在其中希望刺激细胞能量代谢的医学或非医学应用中的用途。

对在子宫内授精中的精子的作用