[发明专利]具有末端羧基的聚乙二醇的生产方法

说明书

提供一种具有末端羧基的聚乙二醇的生产方法，其中，不使用昂贵试剂或者剧毒的重金属化合物并且能够抑制多分散性增大。一种具有末端羧基的聚乙二醇的生产方法包括在5至40℃下在水中用过一硫酸钾氧化由式(I)：CH₃O(CH₂CH₂O)_n(CH₂)_m‑CHO表示的聚乙二醇以生产由式(II)：CH₃O(CH₂CH₂O)_n(CH₂)_m‑COOH表示的聚乙二醇，其中，所述水的pH通过选自由碳酸盐、磷酸盐、柠檬酸盐和醋酸盐所组成的组中的至少一者而被调整为6至8(在上式中，n为10至1,100的数，并且m为2或3)。

技术领域

本发明涉及一种具有末端羧基的聚乙二醇的生产方法。

背景技术

近年来，已经积极地进行将例如激素这样的介质或者例如抗体或者酶这样的生理学活性物质用作药物的制药的发展。当这些物质给药到体内时，由于其经历网状内皮系统的吞噬作用和肾脏中的排泄并从身体排出，所以血液中的滞留性低并且无法获得充分的药效。因此，已经通过用诸如糖类或者聚乙二醇(PEG)这样的水溶性聚合体以修饰药物，而试图改善血液中药物滞留性。已知的是，用聚乙二醇修饰在维持药物的稳定性的同时降低了药物的免疫原性和抗原性。为了增加药物的均匀性(特别是，为了抑制血液中药物滞留性、免疫原性、药效等的变化)需要使用多分散性(重均分子量(Mw)/数均分子量(Mn))小的PEG修饰剂。至今，PEG化的干扰素以及例如PEG化的hrGCSF这样的PEG化的制剂进入市场并且PEG化技术的实用性变得明确。

为了用聚乙二醇修饰例如蛋白质或者酶这样的生理学活性物质，需要将聚乙二醇的末端羟基转化为反应性的官能团。在反应性的官能团的转化中，未反应羟基的残留导致高分子量PEG杂质、具有不同键的PEG化的制剂等副产物。因此，优选的是从羟基向反应性的官能团的转化率高。

其在将聚乙二醇的末端羟基转化为末端羧基时具有特别高的实用性。例如，具有末端羧基的聚乙二醇能够通过使用例如，N-羟基丁二酰亚胺和二环己基碳二亚胺的缩合剂而转化为作为活性酯的琥珀酰亚胺酯。由于在接近生理条件下琥珀酰亚胺酯与伯胺反应以形成稳定的酰胺，所以琥珀酰亚胺酯最常用于蛋白质修饰的酰化剂。在琥珀酰亚胺酯中，琥珀酰亚胺丙酸酯和琥珀酰亚胺丁酸酯在展现与蛋白质的氨基或者生理学活性物质适当的反应性的同时，在水溶液中相对稳定，使得琥珀酰亚胺丙酸酯和琥珀酰亚胺丁酸酯对于生理学活性物质的修饰是特别有用的。

关于聚乙二醇的末端羟基向末端羧基的转化，之前已经进行了若干报道。例如，在专利文献1中(特别是，在其权利要求1中)，描述了一种羧酸的生产方法，其包括使由式Q(OH)_x+y表示的多元醇与由式CH(R’)＝C(R”)-COOR”表示的羧酸反应，并且随后水解获得的产物(式中的定义与专利文献1中描述的定义相同)。

此外，在专利文献2(特别地，其权利要求1)，描述了一种具有羧基的水溶性非肽类聚合体的生产方法，其包括使具有至少一个羟基的水溶性非肽类聚合体与叔烷基丙烯酸酯反应以形成聚合体的酯，并随后用强酸处理聚合体的酯。

然而，在专利文献1和2中描述的生产方法中，存在羟基向羧基的转化率小于85％并且不够高的问题。具体地，在文件1的实例中，转化率为31.9至84.7％，并且在文件2的实例中，转化率为69.1％至73.8％。在要求药物等级的纯度的情况下，需要通过离子交换或者反相HPLC从作为未反应物质的具有末端羟基的聚合体分离出作为产物的具有末端羧基的聚合体。此外，专利文献1和2中描述的生产方法具有反应需要长时间的问题。