[发明专利]一种在淋巴细胞中高水平的和稳定的基因转移的方法

权利要求书

1.一种应用，所述应用为使用一种编码转座因子的微环DNA以及一种转座酶的来源的组合，以稳定地将转座因子整合到哺乳动物细胞的基因组中。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述转座酶的来源是编码所述转座酶的核酸。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，编码所述转座酶的核酸是编码所述转座酶的mRNA、编码所述转座酶的质粒DNA、编码所述转座酶的微环DNA或编码所述转座酶的线性DNA。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，编码所述转座酶的核酸是编码所述转座酶的mRNA。

5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，编码所述转座酶的核酸是编码所述转座酶的微环DNA。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，编码所述转座酶的微环DNA和编码所述转座因子的微环DNA是相同的微环DNA。

7.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述转座酶的来源是转座酶多肽。

8.如前述权利要求任一项所述的应用，其特征在于，所述转座酶是SB100X。

9.如前述权利要求中任一项所述的应用，其特征在于，所述哺乳动物细胞是哺乳动物淋巴细胞。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述哺乳动物淋巴细胞是人淋巴细胞。

11.如权利要求9或10所述的应用，其特征在于，所述淋巴细胞是T淋巴细胞。

12.如权利要求1～8任一项所述的应用，其特征在于，所述哺乳动物细胞是CD8+杀伤T细胞、CD4+辅助T细胞、初始T细胞、记忆T细胞、中枢记忆T细胞、效应记忆T细胞、干细胞样记忆T细胞、恒定T细胞、NKT细胞、细胞因子诱导的杀伤T细胞、g/d T细胞、B淋巴细胞、自然杀伤细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突细胞或粒细胞。

13.如前述权利要求中任一项所述的应用，其特征在于，所述哺乳动物细胞是CD8+杀伤T细胞或CD4+辅助T细胞。

14.如前述权利要求中任一项所述的应用，其特征在于，所述转座因子包含用于表达T细胞受体或嵌合抗原受体的遗传信息，并且所述哺乳动物细胞是人T淋巴细胞。

15.如权利要求14所述的应用，其特征在于，所述T细胞受体或嵌合抗原受体是肿瘤反应性的，并且通过所述应用获得的所述人T淋巴细胞是适用于癌症的过继免疫治疗的肿瘤反应性人T淋巴细胞。

16.如权利要求14或15所述的应用，其特征在于，所述转座因子包含嵌合抗原受体的遗传信息。

17.如权利要求16所述的应用，其特征在于，所述嵌合抗原受体对CD19、CD20、CD22、CD33、CD44v6、CD123、CD135、EpCAM、EGFR、EGFR变体、GD2、ROR1、ROR2、CD269、CD319、CD38或CD138具有特异性。

18.如前述权利要求中任一项所述的应用，其特征在于，编码所述转座因子的微环DNA编码a/b或g/d T细胞受体、细胞因子、自杀基因或转导标记。

19.如前述权利要求中任一项所述的应用，其特征在于，所述应用是在体外应用。