[发明专利]提高含FC区多肽纯化效率的方法

权利要求书

1.一种用于在蛋白A柱层析中增加含Fc区的多肽对蛋白A树脂的动态结合能力的方法，所述方法包括制备作为Fc区的第一多肽链和第二多肽链的第一多肽链和第二多肽链的步骤,所述第一多肽链和第二多肽链具有与所述树脂彼此不同的结合活性，其中所述Fc区是IgG4同种型的Fc区，其中根据EU编号在Fc区的第一多肽链中的位置435处的氨基酸是His，并且根据EU编号Fc区的第二多肽链中的位置435处的氨基酸是Arg。

2.权利要求1所述的方法，其中所述结合能力的增加为5g/L树脂或更多。

3.权利要求1所述的方法，其中所述增加后的所述动态结合能力为45g/L树脂或更多。

4.权利要求1所述的方法，其中所述含Fc区的多肽是抗体。

5.权利要求4所述的方法，其中所述抗体是双特异性抗体。

6.一种使用权利要求1至5中任一项所述的方法纯化含Fc区的多肽的方法。

7.一种使用蛋白A树脂制造含Fc区多肽的方法，其包括以下步骤：

(a)制备Fc区的对所述树脂具有彼此不同的结合活性的第一多肽链和第二多肽链，其中所述Fc区是IgG4同种型的Fc区，其中根据EU编号在Fc区的第一多肽链中的位置435处的氨基酸是His，并且根据EU编号Fc区的第二多肽链中的位置435处的氨基酸是Arg；

(b)比较步骤(a)的含Fc区的多肽在蛋白A柱层析中对蛋白A树脂的动态结合能力与含有对所述树脂相同的结合活性的两条多肽链的含Fc区的多肽在蛋白A柱层析中对蛋白A树脂的动态结合能力；

(c)使包含含有Fc区的第一多肽链的多肽和含有Fc区的第二多肽链的多肽的样品与所述树脂接触；和

(d)收集与树脂结合并包含异源多肽的含Fc区多肽，所述异源多肽包含含有Fc区的第一多肽链的多肽和含有Fc区的第二多肽链的多肽。