[发明专利]用于治疗肌营养不良的方法

说明书

本公开尤其提供用于治疗肌营养不良的改进的组合物和方法。例如，本公开提供通过给予有效量的eteplirsen治疗杜兴氏肌营养不良患者的方法，所述患者具有顺从51号外显子跳跃的DMD基因突变。

相关申请的交叉参考

本申请要求2015年9月30日递交的美国临时申请第62/235477号、2016年1月14日递交的美国临时申请第62/278866号、2016年2月9日递交的美国临时申请第62/293235号以及2016年2月25日递交的美国临时申请第62/299952号的优先权，其内容在此通过参照具体结合。在整个该说明书中引用的任何专利、专利申请和参考文献的内容特此通过参照以其全部结合。

技术领域

本发明涉及用eteplirsen在患者中治疗肌营养不良的改进方法。还提供适合于促进人肌营养不良蛋白基因中51号外显子跳跃的组合物。

背景技术

在多种遗传性疾病中，突变对基因最终表达的影响可通过剪接过程期间所靶向的外显子跳跃的过程来调控。在正常地功能蛋白由于其中的突变而过早终止的情况下，用于通过反义技术修复一些功能蛋白产生的手段已经显示通过在剪接过程期间进行干预是可能的，并且如果与致病突变相关的外显子可从某些基因特异性地缺失，则有时可产生与天然蛋白质具有类似生物学性质或具有足够生物活性以改善由与外显子相关的突变引起的疾病的缩短的蛋白质产物(参见例如Sierakowska, Sambade等人 1996; Wilton, Lloyd等人 1999; van Deutekom, Bremmer-Bout等人 2001; Lu, Mann等人 2003; Aartsma-Rus,Janson等人 2004)。

杜兴氏肌营养不良(DMD)由蛋白质肌营养不良蛋白表达缺陷引起。编码蛋白质的基因含有79个外显子，分布在超过200万个核苷酸的DNA上。改变外显子阅读框或引入终止密码子，或者特征为除去整个的一个或多个框外外显子或重复一个或多个外显子的任何外显子突变，都有可能破坏功能性肌营养不良蛋白的产生，导致DMD。

出生时肌酸激酶水平升高可以记录到疾病发作，并且在生命的第一年可能存在显著的运动缺陷。到7或8岁时，大多数DMD患者步态越来越吃力，并且失去从地板起身并爬上楼梯的能力；到10-14岁时，大多数依赖轮椅。DMD一律是致命的，受影响的个体一般地在其十八九岁或20岁出头时死于呼吸衰竭和/或心力衰竭。DMD的持续进展允许在疾病的所有阶段进行治疗性干预，然而，治疗目前限于糖皮质激素，其与许多副作用相关，包括体重增加、行为变化、青春期变化、骨质疏松症、库欣综合征样面容(Cushingoid facies)、生长抑制和白内障。因此，开发更好的疗法来治疗这种疾病的根本原因势在必行。

已经发现出现了肌营养不良的一种不太严重的形式即贝克型肌营养不良(Beckermuscular dystrophy, BMD)，其中突变(一般地是缺失一个或多个外显子)导致沿着整个肌营养不良蛋白转录物的正确阅读框，使得mRNA翻译成蛋白质不会过早终止。如果在突变的肌营养不良蛋白pre-mRNA的加工中上游和下游外显子的连接保持基因的正确阅读框，则结果是编码具有短内部缺失的保持一些活性的蛋白质的mRNA，导致贝克型表型。

多年来已经知道，不改变肌营养不良蛋白阅读框的一个或多个外显子的缺失会产生BMD表型，而引起移码的外显子缺失将会产生DMD(Monaco, Bertelson等人 1988)。通常，改变阅读框并因此中断正确的蛋白质翻译的肌营养不良蛋白突变(包括点突变和外显子缺失)导致DMD。还应该注意到，某些BMD和DMD患者具有覆盖多个外显子的外显子缺失。