[发明专利]靶向PSCA的嵌合抗原受体

说明书

描述了靶向PSCA的嵌合跨膜免疫受体(CAR)。

发明背景

前列腺癌(PCa)是美国第三大最常见的癌症类型，其中今年预计诊断超过20万例新病例。在大概80％的PCa患者中，肿瘤表型包括前列腺干细胞抗原(PSCA)的过表达。此外，PSCA在接近100％的骨转移性前列腺癌中表达，使得其成为理论上有吸引力的免疫治疗靶标。用于B细胞恶性肿瘤的利用靶向CD19的CAR的近期临床试验已经证明了引人注目的结果，但是利用其他抗原靶标仍然难以重复该成功结果。由于缺少这种受限制的抗原表达(即，用于B细胞恶性肿瘤的CD19)和存在可以显著阻碍CAR功效的免疫抑制性微环境，所以针对固体肿瘤的免疫疗法提出了更困难的肿瘤挑战。重要的是，由于正常组织上的抗原表达水平低，存在中靶脱瘤(on-target，off-tumor)毒性的实例。

虽然创建能够结合期望靶标的CAR所需的基本组分是相当良好理解的，但是设计具有用于安全且有效治疗中所需的质量的CAR具有挑战性。例如，避免针对非癌性细胞的过度活性是重要的，所述非癌性细胞表达低水平的靶标或根本不表达靶标。避免诱发高水平的细胞因子产生也是重要的，所述高水平的细胞因子可以诱发不想要的脱瘤效应。可以影响治疗潜力的其他因素包括但不限于表达CAR的T细胞的复制能力和寿命和稳健的抗肿瘤应答所需的表达CAR的T细胞的整体效应器功能。

发明概述

本文描述的是嵌合跨膜免疫受体(嵌合抗原受体或“CAR”)，其包含胞外域、跨膜区和胞内信号传导域。胞外域包括靶向PSCA的scFv。本文所述的CAR用于治疗前列腺癌和前列腺癌骨转移。

除了靶向PSCA的scFv外，胞外域包括间隔区，其包含例如人IgG4Fc域的部分。CAR的跨膜区包括例如，CD4跨膜域、CD8跨膜域、CD28跨膜域、CD3跨膜域或4IBB跨膜域。胞内信号传导域包括来自人CD3复合体的ζ链(CD3ζ)的信号传导域和共刺激域(例如，OX40、CD28、CD28gg或4-1BB(CD137))共刺激域。当在T细胞的表面上表达时，胞外域使得CAR能够将T细胞活性指向表达PSCA的那些细胞。此类细胞包括前列腺癌细胞。在胞内区中包括与CD3ζ串联(但是不一定直接接近)的共刺激域使得T细胞能够接受共刺激信号。可以工程化改造T细胞，例如，患者特异的自体T细胞以表达本文所述的CAR并且可以扩增工程化改造的细胞并用于ACT。可以使用多种T细胞子集。此外，可以在其他免疫细胞，如NK细胞中表达CAR。在利用表达本文所述的CAR的免疫细胞治疗患者时，所述细胞可以是自体或同种异体(allogenic)T细胞。在一些情况中，所用的细胞是CD4+和CD8+中央记忆T细胞(T_CM)，其是CD45RA-CD62L+，或T_CM/sCM/N细胞(CD45RA+CD62L+)，并且相比于其他类型的患者特异性T细胞的使用，此类细胞的使用在过继性转移后可以改善所述细胞的长期持久性。重要的是，CAR的总体设计避免了针对非癌细胞的不想要的活性，包括仅表达相对低水平的PSCA的非癌细胞。

PSCA scFv可以包括序列：

DIQLTQSPSTLSASVGDRVTITCSASSSVRFIHWYQQKPGKAPKRLIYDTSKLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQWGSSPFTFGQGTKVEIKGSTSGGGSGGGSGGGGSSEVQLVEYGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIKDYYIHWVRQAPGKGLEWVAWIDPENGDTEFVPKFQGRATMSADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCKTGGFWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：38)或其具有高达5个氨基酸取代(例如，保守取代)的变体。