[发明专利]基因修饰的产乙酸细胞

权利要求书

1.能够从碳源生产至少一种高级醇的产乙酸微生物细胞，其中所述产乙酸微生物细胞被基因修饰以包含相对于其野生型细胞增加表达的至少一种酶，即 E₈，即丁酰-CoA: 乙酸CoA转移酶(cat3)，并且其中所述高级醇包含以下式I并具有4至10个碳原子

式I

R= H, CH₃,

n=1- 6，

并且其中增加的表达是通过以下实现的：

-异源酶E8的表达，

-表达酶E8的基因拷贝数的增加，

-使用异源启动子的酶E8的表达，或

-其组合，

其中所述产乙酸微生物细胞是杨氏梭菌（Clostridium ljungdahlii ）或产乙醇梭菌（Clostridium autothenogenum）。

2.根据权利要求1的细胞，其中所述细胞被基因修饰以包含相对于其野生型细胞增加表达的至少一种另外的酶，所述另外的酶选自E₁至E₇和E₉至E₁₁，其中E₁是醇脱氢酶(adh)，E₂是乙醛脱氢酶(ald)，E₃是乙酰乙酰-CoA硫解酶(thl)，E₄是3-羟基丁酰-CoA脱氢酶(hbd)，E₅是3-羟基丁酰-CoA脱水酶(crt)，E₆是丁酰-CoA脱氢酶(bcd)，E₇是电子转移黄素蛋白亚基(etf)，E₉是乙酸激酶(ack)，E₁₁是转氢酶，且E₁₂是反式-2-烯酰-CoA还原酶或巴豆酰-CoA还原酶。

3.根据权利要求1或2的细胞，其中E₈由SEQ ID NO: 1所示。

4.根据权利要求1或2的细胞，其中E₈来自克氏梭菌(Clostridium kluyveri)。

5.根据权利要求1或2的细胞，其中所述细胞被基因修饰以包含相对于其野生型细胞增加表达的以下酶：E₃，即乙酰乙酰-CoA硫解酶(thl)、E₄，即3-羟基丁酰-CoA脱氢酶(hbd)、E₅，即3-羟基丁酰-CoA脱水酶(crt)和E₆，即丁酰-CoA脱氢酶(bcd)。

6.根据权利要求1或2的细胞，其中所述细胞被基因修饰以包含相对于其野生型细胞增加表达的以下酶：E₃，即乙酰乙酰-CoA硫解酶(thl)、E₄，即3-羟基丁酰-CoA脱氢酶(hbd)和E₅，即3-羟基丁酰-CoA脱水酶(crt)。

7.根据权利要求1或2的细胞，其中所述细胞被基因修饰以包含相对于其野生型细胞增加表达的以下酶：E₃，即乙酰乙酰-CoA硫解酶(thl)、E₄，即3-羟基丁酰-CoA脱氢酶(hbd)、E₅，即3-羟基丁酰-CoA脱水酶(crt)、E₆，即丁酰-CoA脱氢酶(bcd)和E7，即电子转移黄素蛋白亚基(etf)。

8.根据权利要求5的细胞，其中所述细胞被进一步基因修饰以包含相对于其野生型细胞增加表达的至少一种酶，所述酶选自E₁，即醇脱氢酶(adh)和酶E₁₂，即反式-2-烯酰-CoA还原酶或巴豆酰-CoA还原酶。