[发明专利]生产和提取二氢硫辛酸的方法

说明书

一种用于生产和提取二氢硫辛酸(DHLA)的方法涉及将R‑硫辛酸生物转化成二氢硫辛酸。所述方法用选自以下任何细菌属的细菌发酵硫辛酸：乳杆菌属、肠球菌属、片球菌属或芽孢杆菌属。更具体地，本发明涉及利用非传统溶剂系统(即，食物油)提取DHLA的方法。通常，从已经灭活或杀死的细胞中分离本发明方法中产生的DHLA。

技术领域

本发明涉及R-硫辛酸到二氢硫辛酸(DHLA)的生物转化。所述方法用选自以下任何细菌属的细菌发酵硫辛酸：乳杆菌属、肠球菌属、片球菌属或芽孢杆菌属。更具体地，本发明涉及利用非传统溶剂系统(即，食物油)提取DHLA的方法。通常，从已经灭活或杀死的细胞中分离本发明方法中产生的DHLA。

背景技术

二氢硫辛酸是一种有价值的营养物质。由于在各种标准条件下易于氧化成其二硫化物形式(即，硫辛酸)，因此它的生产和分离变得困难。

DHLA典型地在正常代谢活动期间通过硫辛酸或α-硫辛酸(ALA)的氧化还原转化在体内产生。然而，身体通常仅产生足以帮助代谢功能的量的DHLA。然而，已经至少部分地证明DHLA是一种有效的抗氧化剂和螯合剂，其可用于清除活性氮(RNS)和活性氧(ROS)(例如像单线态氧)，所述活性氮和活性氧可以促成许多降解性病理综合征，如糖尿病、青光眼、动脉粥样硬化和其他神经病。还已经至少部分地发现DHLA可有效预防或修复细胞中的氧化损伤并且在身体中再生某些重要的营养素，例如像维生素C和E。然而，没有DHLA可商购获得；只有来源于不具有DNA的非生命来源的ALA，并且ALA(特别是在长期使用下)可以诱导细胞DNA降解。因此认为细胞中使用的用于制造最少量的DHLA的这种ALA对于长期使用是不利的。相反，源自曾经活的来源的DHLA包括已知支持细胞DNA的DNA。在Marshall的美国专利8,530,209中，用于药剂或营养补充剂中的稳定化的二氢硫辛酸(DHLA)源自曾经活的来源。具体地，稳定化的DHLA化合物可以源自微生物培养基，所述微生物培养基包含至少一种活益生生物、R-硫辛酸和至少一种营养保健剂或营养剂。

显然，难以分离和/或稳定大量的DHLA。如上所论述，对于天然来源，可以在体内分离相对较少的量。然而，如果可以找到一种方式原位制备和分离大量的DHLA，这将代表对营养保健和医学领域有价值的贡献。

发明内容

本发明涉及利用细菌将硫辛酸生物转化成二氢硫辛酸(DHLA)。

本发明的一般目的是提供用于生产包含DHLA或其盐的有益化合物的方法，所述DHLA或其盐用于药剂或营养补充剂中。

在一个实施例中，本文描述了用于生产DHLA的方法，所述方法包括将包含至少一种活益生生物、R-硫辛酸和/或至少一种营养剂的微生物培养基分散在蒸馏水中以形成发酵液，将发酵液在预定温度下孵育一段选定的时间以诱导益生活性；任选地添加有机乙醇以停止益生活性，并且借助于橄榄油提取从发酵液中分离所希望的化合物。

在另一个实施例中，描述了用于生产二氢硫辛酸(DHLA)或其盐的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)制备包含乳杆菌属物种、肠球菌属物种、片球菌属物种或芽孢杆菌属物种中的至少一种物种的微生物培养物；

(b)用所述微生物培养物处理含有糖蜜、N-乙酰基-L-半胱氨酸、大米蛋白、营养酵母、糖、一种或多种矿物盐、一种或多种核苷酸和第一食用油的水性发酵液以形成微生物发酵液；

(c)在约35℃至约40℃的温度下孵育所述微生物发酵液至少约48小时；

(d)给所述微生物发酵液供料R-硫辛酸、姜黄根茎、N-乙酰基-L-半胱氨酸、谷胱甘肽、L-精氨酸和NADH；

(e)调节pH至约8.0；

(f)孵育所述微生物发酵液至少约10天；