[发明专利]副溶血弧菌噬菌体Vib-PAP-1及其用于抑制副溶血弧菌增殖的用途

说明书

本发明涉及一种从自然界中分离并且可特异性地杀灭副溶血弧菌细胞的短尾噬菌体Vib‑PAP‑1(保藏编号：KCTC 12817BP)以及使用包含所述噬菌体作为活性成分的组合物来预防和治疗副溶血弧菌感染的方法，所述噬菌体具有由SEQ ID NO:1的核苷酸序列表示的基因组。

技术领域

本发明涉及一种从自然界中分离的感染并杀灭副溶血弧菌 (Vibrioparahaemolyticus)细胞的噬菌体，以及使用包含该噬菌体作为活性成分的组合物来预防和治疗副溶血弧菌感染的方法。更具体地讲，本发明涉及一种从自然界中分离的并且可特异性地杀灭副溶血弧菌细胞的短尾噬菌体Vib-PAP-1(保藏编号：KCTC12817BP)，以及使用包含所述噬菌体作为活性成分的组合物来预防副溶血弧菌感染和随后对其进行治疗的方法，该噬菌体具有由SEQ ID NO:1的核苷酸序列表示的基因组。

背景技术

副溶血弧菌是一种属于弧菌属的革兰氏阴性杆菌，会引起人类急性食物中毒和肠炎以及鱼类的弧菌病。鱼类的弧菌病存在多种症状。受感染的鱼类可表现出身体颜色变暗和皮肤溃烂，并且有时会显示出吻突变红和皮肤发红。此外，就解剖学病征而言，观察到肝脏出血或充血。

由副溶血弧菌感染引起的弧菌病爆发频繁发生，导致了严重的经济损失。因此，需要开发一种用于预防并进一步治疗副溶血弧菌感染的新方法。

由于野生鱼捕捞不足时通过鱼类养殖很容易获得食物资源，所以鱼类养殖业每年都在持续快速发展。然而，随着水产养殖业日益发展，围绕水产养殖的由饲料引起的环境污染日益严重。具体地讲，饲料中包含的大量抗生素被广泛传播，以致严重危及人类健康。在水产养殖中，过量地利用化学治疗抗生素来实际地根除细菌性疾病。结果，频繁催生出多重耐药性菌株，这导致水产养殖遭受经济损失。此外，这种无任何限制地滥用抗生素会威胁全民健康，并因而在精神上影响各国减少鱼类的食用，从而导致鱼类养殖业整体竞争力减弱。因此，迫切需要开发一种预防细菌感染和随后对其进行有效治疗的新方法。尤其是海产品的安全性已成为主要的社会问题，因此优选的是环境友好的方法。

最近，使用噬菌体作为一种治疗细菌感染的新方法引起了我们的注意。具体地讲，我们对噬菌体高度感兴趣的原因在于基于噬菌体的处理是一种自然友好的方法。噬菌体是一种感染细菌的极其微小的微生物。一旦噬菌体感染细菌，噬菌体就在细菌细胞内增殖。增殖后，后代噬菌体会摧毁细菌的细胞壁以逃离宿主，这表明噬菌体具有杀灭细菌的能力。噬菌体感染的特征在于其高度特异性，使得某种噬菌体仅感染特定的细菌。也就是说，能够被某种噬菌体感染的细菌是有限的，这表明噬菌体只能杀灭某种特定的细菌而不会伤害其他细菌。由于这种细胞特异性，噬菌体对靶细菌产生抗菌作用，而不会影响环境中或鱼类肠道中的共生细菌。同时，常规抗生素一致地作用于各种类型的细菌。但是，噬菌体的使用却不会干扰鱼肠道内的正常微生物群，因为其选择性地杀灭靶细菌。因此，与任何其他抗生素相比，噬菌体可安全地使用并因此降低发生不利作用的概率。

1915年，英国细菌学家Twort首次发现了噬菌体，当时他注意到微球菌菌落溶化并且因某种未知的东西变得透明。1917年，法国细菌学家dHerelle发现痢疾患者粪便滤液中的痢疾志贺氏菌(Shigella dysenteriae)被某种东西溶化了，并且进一步对这种现象进行了研究。结果，他独立地鉴定出了噬菌体，并将其命名为意指细菌杀手的噬菌体。自那以后，已不断鉴定出特异性作用于此类病原菌(诸如志贺氏菌(Shigella)、伤寒沙门氏菌(Salmonella Typhi)和霍乱弧菌(Vibrio cholerae))的噬菌体。

由于噬菌体的这种杀灭细菌的独特能力，噬菌体已得到研究并预期作为治疗细菌感染的更好方法。然而，在Fleming发现青霉素之后，由于抗生素的普及，仅东欧一些国家和苏联在继续研究噬菌体。 2000年以后，由于耐抗生素细菌的增加，常规抗生素的优势逐渐消失。因此，噬菌体作为可替代常规抗生素的新型抗菌剂重新受到关注。此外，最近世界各地政府加强了对使用抗生素的规定。人们对噬菌体的兴趣日益增加，并且也越来越多地实现了工业应用。