[发明专利]细胞分离装置及其使用方法

说明书

提供了一种细胞分离装置，其被构造用于从液体中的微载体或球状体中分离出细胞。所述细胞分离装置包括：容器和多孔网，所述容器包括第一端口、第二端口和腔体；所述多孔网被设置在腔体中以将腔体分成第一隔室和第二隔室，其中，第一端口与腔体的第一隔室连通，第一端口位于多孔网的第一侧，其中，第二端口与腔体的第二隔室连通，第二端口位于多孔网的第二侧，并且其中，所述多孔网定位在腔体中，使得其相对于通过多孔网的液体流动具有基本上垂直的取向或倾斜的取向。

相关申请的交叉引用

本申请要求2015年12月22日提交的系列号为62/270,950的美国临时申请的优先权权益，本文以该申请的内容为基础并通过引用将其全部结合入本文。

技术领域

本公开涉及细胞分离装置以及使用细胞分离装置从液体(例如细胞培养基)中的微载体或球状体中分离出细胞的方法。

背景技术

存在几种已知的从位于细胞培养基内的微载体中分离出细胞的技术，包括例如差异梯度离心、声共振、切向流过滤、旋转过滤器和使用锥形或倾斜板的沉降。大多数的这些已知技术需要昂贵的资产设备并且操作复杂。用于从微载体中以及从潜在地位于细胞培养基中的球状体中分离出细胞的两种较不复杂且可商购的装置为Steriflip过滤单元和HyQHarvestainer。

Steriflip过滤单元被设计成通过下述操作起作用：将过滤单元附接于含有细胞培养基(包括微载体)的标准50毫升离心管，使过滤单元倒置，施加真空以在附接的50毫升离心管中收集经过过滤的细胞。Steriflip过滤单元由EMDMillipore制造。

HyQ Harvestainer由赛默科技公司(Thermo Scientific)制造，其能够容纳几百升的培养基，并且依靠泵对通过装置的细胞、微载体和培养基进行灌注。更具体来说，HyQHarvestainer在具有灌注培养基出口的一个较大的液体不可渗透的结构化袋内具有网袋。在将细胞、微载体和培养基溶液灌注并通过HyQ Harvestainer之前，重复洗涤微载体并在外部生物反应器中使细胞与微载体酶促分离。微载体被保留在HyQ Harvestainer的内部网袋中，并且细胞和培养基通过内部网袋并随后离开外部的结构化袋进入细胞收集容器中。可以理解，所要求的步骤使得HyQ Harvestainer的使用烦琐。

这些过滤单元和其他标准过滤单元均使多孔网处于水平构造中，以垂直于细胞培养基的流动。因此，当使用标准过滤单元时，细胞培养基流动通过水平取向的多孔网易堵塞，这是因为微载体或球状体落在水平的多孔网上并堵塞水平取向的多孔网中的孔。本公开解决了这一问题及其他问题。

发明内容

在本申请的独立权利要求中描述了细胞分离装置以及使用所述细胞分离装置的方法。在从属权利要求中描述了细胞分离装置以及使用所述细胞分离装置的方法的有利的实施方式。

在一个方面中，本公开提供了被构造用于从液体中的微载体或球状体中分离出细胞的细胞分离装置。所述细胞分离装置包括容器，其具有第一端口、第二端口和腔体。所述细胞分离装置还包括多孔网，其位于腔体中以将腔体分成第一隔室和第二隔室。第一端口与腔体的第一隔室连通。另外，第一端口位于多孔网的第一侧。第二端口与腔体的第二隔室连通。另外，第二端口位于多孔网的第二侧。所述多孔网定位在腔体中，使得其相对于通过多孔网的液体流动具有基本垂直取向或倾斜取向。通过具有垂直或倾斜的多孔网，所述细胞分离装置比传统的细胞分离装置具有显著改进，这是因为当使用新的细胞分离装置时，通过垂直或倾斜的多孔网的液体流动不再像传统的细胞分离装置中那样容易堵塞，因为微载体或球状体不会像传统的细胞分离装置的水平多孔网中那样，由于重力而堵塞垂直或倾斜的多孔网内的大部分孔。