[发明专利]VI-B型CRISPR酶和系统有效
| 申请号： | 201680075720.1 | 申请日： | 2016-10-21 |
| 公开（公告）号： | CN109153980B | 公开（公告）日： | 2023-04-14 |
| 发明（设计）人： | 张锋;A·司马刚;N·皮祖查;D·B·T·考克斯;E·S·兰德 | 申请（专利权）人： | 布罗德研究所有限公司;麻省理工学院 |
| 主分类号： | C12N9/22 | 分类号： | C12N9/22;C12N15/55;C12N15/113 |
| 代理公司： | 北京华睿卓成知识产权代理事务所(普通合伙) 11436 | 代理人： | 程淼 |
| 地址： | 美国马萨诸塞*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | vi crispr 系统 | ||
1.一种非天然存在的或工程化的组合物，该组合物包含
i)VI-B型CRISPR-Cas效应蛋白，以及
ii)VI-B型CRISPR-Cas crRNA，
其中该crRNA从5’至3’方向包含：a)能够杂交到靶RNA序列上的指导序列，和b)同向重复序列，
由此形成CRISPR复合物，该复合物包含与该指导序列复合的该VI-B型CRISPR-Cas效应蛋白，该指导序列杂交到该靶RNA序列上；
其中该效应蛋白在C-末端包含一个HEPN结构域并且在该蛋白的N-末端包含另一个HEPN结构域。
2.如权利要求1所述的非天然存在的或工程化的组合物，该组合物包含VI-B型CRISPR-Cas辅助蛋白，该辅助蛋白增强VI-B型CRISPR-Cas效应蛋白活性。
3.如权利要求2所述的非天然存在的或工程化的组合物，其中该增强VI-B型CRISPR-Cas效应蛋白活性的辅助蛋白是csx28蛋白。
4.如权利要求1所述的非天然存在的或工程化的组合物，该组合物包含VI-B型CRISPR-Cas辅助蛋白，该辅助蛋白阻遏VI-B型CRISPR-Cas效应蛋白活性。
5.如权利要求4所述的非天然存在的或工程化的组合物，其中该阻遏VI-B型CRISPR-Cas效应蛋白活性的辅助蛋白是csx27蛋白。
6.如权利要求1至5中任一项所述的非天然存在的或工程化的组合物，该组合物包含两种或更多种VI-B型CRISPR-Cas crRNA。
7.如权利要求1所述的非天然存在的或工程化的组合物，其中该指导序列杂交到原核细胞中的靶RNA序列上。
8.如权利要求1所述的非天然存在的或工程化的组合物，其中该指导序列杂交到真核细胞中的靶RNA序列上。
9.如权利要求1所述的非天然存在的或工程化的组合物，其中该VI-B型CRISPR-Cas效应蛋白包含一个或多个核定位信号(NLS)。
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