[发明专利]提高植物氮利用效率的方法

权利要求书

1.用于提高水稻的生长、产量、生物量、农业氮利用效率、N回收效率、胁迫耐受性和/或总N含量和/或减轻胁迫对水稻的影响的方法，包括向水稻中引入并表达核酸构建体，所述核酸构建体包含与硝酸盐诱导型启动子NAR2.1可操作地连接的NRT 2.1、NRT 2.2核酸序列，其中所述硝酸盐诱导型启动子如SEQ ID No:7所示,其中所述NRT2.1、NRT2.2核酸序列分别如SEQ ID NO:1、3所示；所述的胁迫为干旱、高盐、寒冷胁迫中的任意一种或多种。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法包括向所述水稻的基因组中引入突变，其中所述突变是插入至少一个或多个额外拷贝的以下各项：

-NRT2.1、NRT 2.2基因序列，使得至少一种序列与NAR2.1启动子序列可操作地连接；

-NAR2.1启动子序列，使得所述启动子序列与至少一种内源性NRT2.1、2.2基因序列可操作地连接；和/或

-与NAR2.1启动子序列可操作地连接的NRT 2.1、NRT 2.2基因序列；其中所述的NAR2.1启动子序列如SEQ ID No:7所示；使用靶向基因组编辑引入所述突变。

3.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其中NRT 2.1、NRT 2.2核酸的表达谱与对照水稻相比被改变。

4.根据权利要求3所述的方法，其中改变表达谱包括改变水稻中NRT 2.1、NRT 2.2与NAR2.1的相对表达比率。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述比率与对照水稻中的比率相比是降低的。

6.根据权利要求5所述的方法，其中水稻秆中的NRT2.1:NAR2.1、NRT2.2:NAR2.1:NAR2.1比率低于7:1，与此相比，对照水稻中的比率至少低于10:1，其中所述比率低于对照水稻中的比率。

7.根据权利要求6所述的方法，其中水稻秆中的NRT2.1:NAR2.1、NRT2.2:NAR 2.1比率低于至少6:1，与此相比，对照水稻中的比率至少低于9:1，其中所述比率低于对照水稻中的比率。

8.根据权利要求7所述的方法，其中水稻秆中的NRT2.1:NAR2.1、NRT2.2:NAR 2.1比率低于至少5:1，与此相比，对照水稻中的比率至少低于8:1，其中所述比率低于对照水稻中的比率。

9.根据权利要求6所述的方法，其中水稻秆中的NRT2.1:NAR2.1、NRT2.2:NAR 2.1比率低于至少4.7:1，与此相比，对照水稻中的比率至少低于7.2:1，其中所述比率低于对照水稻中的比率。

10.核酸构建体，其包含与调控序列可操作地连接的如SEQ ID No:1、3中任一项所定义的核酸序列，其中所述调控序列是硝酸盐诱导型启动子，所述硝酸盐诱导型启动子如SEQID No:7所示。

11.包含根据权利要求10所述的核酸构建体的载体。

12.用于制备具有提高的生长、生物量、产量、农业氮利用效率、N回收效率、胁迫耐受性和/或总N含量或减轻胁迫对水稻的影响的转基因水稻的方法，所述方法包括在水稻或水稻细胞中引入并表达权利要求10所述的核酸构建体。

13.用于制备在胁迫条件下具有提高的产量的转基因水稻的方法，所述方法包括在水稻或水稻细胞中引入并表达权利要求10所述的核酸构建体。

14.权利要求10所述的核酸构建体在提高水稻的生长、生物量、产量、农业氮利用效率、N回收效率和/或总N含量中的用途。