[发明专利]使用双特异性抗体的方法

权利要求书

1.使用式A-X:Y-B的异二聚体系连的双特异性蛋白质复合物的方法，其中：

A-X是第一种融合蛋白；

Y-B是第二种融合蛋白；

X:Y是异二聚体系链；

是X与Y之间的结合相互作用；

A是双特异性蛋白质复合物的第一种蛋白质成分，其选自抗体或其结合片段和抗原(包括例如蛋白质配体)；

B是多特异性蛋白质复合物的第二种蛋白质成分，其选自抗体或结合片段或抗原(包括例如蛋白质配体)；

X是结合对的第一种结合配偶体，其独立地选自抗原或抗体或其结合片段；且

Y是结合对的第二种结合配偶体，其独立地选自抗原或抗体或其结合片段；

其中A对细胞表面蛋白质(即细胞表面标志物)具有特异性，且

B俘获(例如结合)分泌自细胞的感兴趣的可溶性分子，

条件是当X是抗原时，Y是对X表示的抗原具有特异性的抗体或其结合片段，并且当Y是抗原时，X是对Y表示的抗原具有特异性的抗体或其结合片段，该方法包含下列步骤：

i)将未复合形式的融合蛋白A-X和B-Y的组合导入细胞用于分析，或加入异二聚体系连的双特异性蛋白质复合物形式的A-X:Y-B，并且

ii)检测A或B成分对感兴趣的可溶性分子的俘获(例如结合)。

2.权利要求1的方法，其中感兴趣的可溶性分子选自包含以下的组：激素，细胞因子，趋化因子，化学引诱物，白三烯，前列腺素，血管活性胺，酶，补体和补体片段，脂质，鞘脂，第二信使成分(例如；一氧化氮，cAMP等)，维生素，矿物质，阳离子，阴离子，糖，凝血因子，急性期蛋白，γ球蛋白(包括免疫球蛋白)，白蛋白，可溶性细胞膜受体，细胞表达蛋白的剪接变体，核酸，小膜囊泡(例如外来体，微泡，脂质体等)，分泌肽，免疫复合物和来自死亡或垂死细胞的胞内蛋白质。

3.权利要求2的方法，其中感兴趣的可溶性分子是细胞因子。

4.权利要求3的方法，其中细胞因子选自包含以下的组:IL-1a、IL-1b,IL-1Ra、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-14、IL-15IL-16、IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17F、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-25、IL-26、IL-27、IL-28、IL-29、IL-30、IL-31、IL-32、IL-3、IL-34、IL-35、IL-36a、IL-36b、IL-36g、IL-37a、IL-37、IL-38,TNSF1、TNFSF2、TNFSF3、TNFSF4、TNFSF5、TNFSF6、TNFSF7、TNFSF8、TNFSF9、TNFSF10、TNFSF11、TNFSF12、TNFSF13、TNFSF13b、TNFSF14、TNFSF15、TNFSF18、IFNa、IFNb、IFNe、IFNk、IFNw、IFNg、IFNl1、IFNl2、IFNl2、CSF1、CSF2、CSF3、TGFb1、TGFb2、TGFb3、CLC、CNTF、瘦素、OPG、LIF、Neuropoietin、制癌素M、NGF、BDNF、NT-3、PAI-1、RBP4、脂联素、Apelin、嵌合素、内脂素、硬骨素和DKK-1GM。

5.权利要求2的方法，其中感兴趣的可溶性分子是趋化因子。

6.权利要求5的方法，其中所述趋化因子选自包含以下的组：CCL1、2、3、4、5、6、7、8、9/10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、CXCL 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、XCL1、XCL2和CX3CL1。

7.权利要求2的方法，其中感兴趣的可溶性分子是免疫球蛋白。