[发明专利]用于测定谷物、面粉、植物和复合食品中的谷物淀粉酶胰蛋白酶抑制剂的生物活性、量、除去或失活的方法

权利要求书

1.一种降低食品的ATI含量的方法，所述方法包括将所述食品在提取缓冲液中孵育足以使所述食品的所述ATI含量降低至少50％的持续时间，随后从所述食品中除去所述提取缓冲液。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述提取缓冲液是中性、近中性或碱性溶剂或缓冲液。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述提取缓冲液选自由以下各项组成的组：PBS、Tris缓冲液、水和碳酸氢铵或碳酸氢钠。

4.如权利要求2或3所述的方法，其中所述提取缓冲液还包含洗涤剂或洗涤剂混合物。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述洗涤剂或洗涤剂混合物选自由以下各项组成的组：十二烷基硫酸钠、Triton X-100、Tween-20和脱氧胆酸钠。

6.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述提取缓冲液还包含还原剂。

7.如权利要求6所述的方法，其中所述还原剂选自由以下各项组成的组：巯基乙醇、二硫赤藓糖醇(DTT)、半胱氨酸、用氧化型谷胱甘肽(GSSG)平衡的谷胱甘肽(GSH)、亚硫酸盐和硫氧还蛋白。

8.如权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述提取缓冲液还包含至少一种蛋白酶和/或工程化为还原和/或降解ATI的合成酶。

9.如权利要求8所述的方法，其中所述蛋白酶是胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶、嗜热菌蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、真菌蛋白酶、酵母蛋白酶或细菌蛋白酶。

10.如权利要求9所述的方法，其中所述碱性蛋白酶是丝氨酸蛋白酶。

11.如权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述提取缓冲液还包含烷化剂。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述烷化剂是碘乙酰胺，并且通过添加过量还原剂将所述烷化剂进一步淬灭。

13.如权利要求1至12中任一项所述的方法，其中使所述食品在孵育之前机械分离。

14.如权利要求13所述的方法，其中使所述机械分离的食品在孵育之前干燥。

15.如权利要求14所述的方法，其中所述干燥是空气干燥或冷冻干燥。

16.如权利要求14或15所述的方法，其中，在所述干燥之前，使所述机械分离的食品与水性溶剂或沸点低于水的有机溶剂接触。

17.如权利要求16所述的方法，其中所述有机溶剂选自由丙酮和乙醇组成的组。

18.一种从食品中提取淀粉酶胰蛋白酶抑制剂(ATI)的方法，所述方法包括：

A)将所述食品与提取缓冲液一起在混合物中孵育；

B)对所述混合物进行离心以形成沉淀和上清液；

C)对所述上清液进行干燥；以及

D)在重构缓冲液中重构所述干燥的上清液，

其中提取的ATI存在于所述重构缓冲液中。

19.如权利要求18所述的方法，其中所述食品在提取之前未被加工。

20.如权利要求18所述的方法，其中所述食品是加工食品。

21.如权利要求18所述的方法，其中所述食品是麸质。