[发明专利]用于生产皮肤等同物的方法及其用于体外测试和体内移植的用途

权利要求书

1.一种用于生产皮肤等同物的方法，包括以下步骤：

a）生产含有第一层和第二层的真皮基质，其包括以下步骤：

i）提供所述第一层；

ii）提供包含液体和选自胶原蛋白、弹性蛋白和/或透明质酸的至少一种聚合物的可聚合溶液，其中所述可聚合溶液还包含活细胞；

iii）将所述可聚合溶液添加到所述第一层中；

iv）使所述溶液聚合以形成所述第二层；

v）压缩所述第二层，其中由于所述压缩，所述第二层的液体含量降低，并且使所述第一层与所述第二层结合在一起以形成所述真皮基质；以及

vi）将至少一个腔引入所述真皮基质中；

b）将至少一个毛囊和/或毛囊胚芽引入步骤a）中产生的所述真皮基质的所述至少一个腔中以产生皮肤替代物；以及

c）将选自成纤维细胞、内皮细胞、脂细胞、神经细胞、腺细胞、黑素细胞或角化细胞的至少一种另外的细胞群添加到所述皮肤替代物中以产生所述皮肤等同物。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述第一层包含天然皮肤物质或人造皮肤物质。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述第一层不含活细胞。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述可聚合溶液的活细胞包括间充质干细胞和结缔组织细胞中的至少一种。

5.根据权利要求3所述的方法，其中，所述可聚合溶液的活细胞包括间充质干细胞和结缔组织细胞中的至少一种。

6.根据权利要求1、2和5中任一项所述的方法，其中，在步骤iv）之前，通过搅拌使所述可聚合溶液中的聚合物图案化。

7.根据权利要求3所述的方法，其中，在步骤iv）之前，通过搅拌使所述可聚合溶液中的聚合物图案化。

8.根据权利要求4所述的方法，其中，在步骤iv）之前，通过搅拌使所述可聚合溶液中的聚合物图案化。

9.根据权利要求1、2、5和7-8中任一项所述的方法，其中，通过离心、沉降或力的机械施加来进行所述第二层的压缩。

10.根据权利要求3所述的方法，其中，通过离心、沉降或力的机械施加来进行所述第二层的压缩。

11.根据权利要求4所述的方法，其中，通过离心、沉降或力的机械施加来进行所述第二层的压缩。

12.根据权利要求6所述的方法，其中，通过离心、沉降或力的机械施加来进行所述第二层的压缩。

13.根据权利要求1、2、5、7-8和10-12中任一项所述的方法，其中，方法步骤iv）、v）或vi）依次或同时进行。

14.根据权利要求3所述的方法，其中，方法步骤iv）、v）或vi）依次或同时进行。

15.根据权利要求4所述的方法，其中，方法步骤iv）、v）或vi）依次或同时进行。

16.根据权利要求6所述的方法，其中，方法步骤iv）、v）或vi）依次或同时进行。

17.根据权利要求9所述的方法，其中，方法步骤iv）、v）或vi）依次或同时进行。

18.根据权利要求1、2、5、7-8、10-12和14-17中任一项所述的方法，其中，在步骤vi）中将所述至少一个腔引入所述真皮基质中在步骤iv）中的聚合期间或聚合之后进行。