[发明专利]用于检测细菌的方法和设备

权利要求书

1.一种用于细菌检测的方法，包括以下步骤：

A)提供一种或多种悬浮液，每种所述悬浮液包含至少一个种类的标记的测试噬菌体，所述标记的测试噬菌体特异性结合待检测的细菌种类；

B)将待测试是否存在至少一种待检测的细菌种类的样品添加到所述一种或多种悬浮液中；

C)过滤所得反应混合物，其中使用孔径为0.1μm至0.5μm的过滤器；

D)检测渗余物中的细菌-噬菌体-复合物，条件是存在至少一种待检测的细菌种类，其中所述复合物由所述至少一种待检测的细菌种类的细菌和结合至其的所述至少一个种类的测试噬菌体的测试噬菌体组成；

E)检测滤液中未结合的测试噬菌体；

F)处理器辅助处理所接收的由步骤D)和E)中的检测产生的信号，并且将检测结果输出给用户，

其中，所述一种或多种悬浮液还包含标记的参考噬菌体，所述标记的参考噬菌体不结合任何待检测的细菌种类并且具有与所述测试噬菌体分离的标记，使得也能够在步骤E)中检测标记的参考噬菌体；或者其中使用标记的微米或纳米颗粒替代标记的参考噬菌体，所述标记的微米或纳米颗粒不结合任何待检测的细菌种类，并且由于其尺寸小而能够通过所述过滤器。

2.根据权利要求1所述的用于细菌检测的方法，其中，所述待检测的细菌种类选自包含下列组成的组：金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、表皮葡萄球菌、肺炎链球菌、化脓性链球菌、流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、赫氏埃希菌、EHEC、阴沟肠杆菌、粪肠球菌、绿脓杆菌、奇异变形杆菌、普通变形杆菌、腐生葡萄球菌、脆弱拟杆菌、屎肠球菌、产气肠杆菌、粘质沙雷氏菌、B-链球菌(无乳链球菌)、沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体、解脲支原体、人型支原体、肺炎支原体、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、弗氏柠檬酸杆菌、卡他莫拉菌、嗜麦芽寡食单胞菌、多杀巴斯德菌、鲍氏不动杆菌、雷氏普罗威登斯菌、百日咳杆菌，炭疽杆菌、蜡样芽孢杆菌、流产布鲁氏菌、羊布鲁氏菌、肉毒梭菌、艰难梭菌、破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、披衣菌、白喉棒状杆菌、土拉弗朗西斯菌、阴道加德纳菌、单核细胞增多性李斯特菌、摩氏摩根菌、麻风分枝杆菌、结核分枝杆菌、星状诺卡菌、邦戈沙门菌、肠道沙门菌，志贺氏菌属、霍乱弧菌、伯氏疏螺旋体、鼠疫耶尔森氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、贝纳特考克斯体、气单胞菌属，邻单胞菌属、嗜麦芽黄单胞菌、梅毒螺旋体、侵蚀艾肯菌、小螺菌、普氏立克次体、立氏立克次体、康氏立克次体、克罗诺杆菌属、弯曲杆菌属和嗜肺军团菌。

3.根据权利要求1所述的用于细菌检测的方法，其中，每种所述一种或多种悬浮液包含两个或更多个种类的标记的测试噬菌体，每种所述标记的测试噬菌体特异性结合不同的待检测的细菌种类，并且其中所述种类的标记是分离的或部分重叠的，并且其中所述标记是测试噬菌体的各个种类的特征。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的用于细菌检测的方法，其中，所述标记包含至少一种具有荧光或化学发光性质的报告分子或者至少一种通过与二级分子相互作用而发光的报告分子。

5.根据权利要求4所述的用于细菌检测的方法，其中，所述标记分别由至少一种荧光报告分子组成，并且所述检测通过测量所述荧光进行，其中在200-1000nm的波长范围内进行至少一种荧光报告分子的激发。

6.根据权利要求4所述的用于细菌检测的方法，其中，所述至少一种报告分子与所述噬菌体的衣壳区域中的蛋白偶联。

7.根据权利要求4所述的用于细菌检测的方法，其中，通过光发射的时间分辨测量来进行所述检测。

8.根据权利要求1-3中任一项所述的用于细菌检测的方法，还包括将所述样品与所述一种或多种悬浮液混合并培养所得反应混合物的步骤G)，其中步骤G)接着步骤B)。

9.根据权利要求8所述的用于细菌检测的方法，还包括对细菌-噬菌体-复合物与未结合的噬菌体进行预分离的步骤，其中所述预分离接着步骤B)或G)。