[发明专利]检测和定量微生物的靶核酸序列

权利要求书

1.一种用于检测和/或定量从受试者获得的样品中微生物的靶核酸序列的存在的方法，所述方法包括扩增所述微生物的核酸的CpG岛中的靶序列，而不论所述CpG岛的甲基化状态如何。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述靶序列处于所述微生物的核酸的CpG岛的核酸的5'末端内。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述方法是聚合酶链反应(PCR)。

4.如权利要求3所述的方法，其中所述聚合酶链反应选自由以下各项组成的组：定量聚合酶链反应、数字聚合酶链反应、实时聚合酶链反应、以及传统聚合酶链反应。

5.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其中从所述受试者获得的所述样品是血浆样品、血清样品或全血样品。

6.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其中从所述受试者获得的所述样品包含cfDNA(无细胞DNA)。

7.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述微生物是病毒、细菌、真菌或寄生物。

8.如权利要求7所述的方法，其中所述微生物是病毒。

9.如权利要求7所述的方法，其中所述微生物是细菌。

10.如权利要求8所述的方法，其中所述病毒是埃-巴二氏病毒(Epstein-Barrr virus)(EBV)。

11.如权利要求10所述的方法，其中所述靶序列处于EBV的BamHI-W区域的CpG岛中。

12.如权利要求11所述的方法，其中EBV的BamHI-W区域的所述CpG岛选自由以下各项组成的组：

CTCCTCTCCAACCTTCGCTCCACCCTAGACCCCAGCTTCTGGCCTCCCCGGGTCCACCAGGCCAGCCGGAGGGACCCCGGCAGCCCGGGCGAGTCGCCTTCCCTCTCCCCTGGCCTCTCCTTCCCGCCTCCCACCCGAGCCCCCTCAGCTTGCCTCCCCACCGGGTCCATCAGGCCGGCCGGAGGGACCCCGGCGGCCCGGTGTCA(SEQ ID NO.:6)；

AGGCCATGCGCGCCCTGTCACCAGGCCTGCCAAAGAGCCAGATCTAAGGCCGGGAGAGGCAGCCCCAAAGCGGGTGCAGTAACAGGTAATCTCTGGTAGTGATTTGGACCCGAAATCTGACACTTTAGAGCTCTGGAGGACTTTAAAACTCTAAAAATCAAAACTTTAGAGGCGAATGGGCGCCATTTTGTCCCCACGCGCGCATAATGGCGGACCTAGGCCTAAAACCCCCAGGAAGCGGGTCTATGGTTGGCTGCGCTGCTGCTATCTTTAGAGGGGAAAAGAGGAATAAGCCCCCAGACAGGGGAGTGGGCTTGTTTGTGACTTCACCAAAGGTCAGGGCCCAAGGGGGTTCGCGTTGCTAGGCCACCTTCTCAGTCCAGCGCGTTTACGTAAGC(SEQ ID NO.:7)；

CTGGTATAAAGTGGTCCTGCAGCTATTTCTGGTCGCATCAGAGCGCCAGGAGTCCACACAAATGTAAGAGGGGGTCTTCTACCTCTCCCTAGCCCTCCGCCCCCTCCAAGGACTCGGGCCCAGTTTCTAACTTTTCCCCTTCCCTCCCTCGTCTTGCCCTGCGCCCGGGGCCACCTTCATCACCGTCGCTGACTCCGCCATCCAAGCCTAGGGGAGACCGAAGTGAAGGCCCTGGACCAACCCGGCCCGGGCCCCCCGGTATCGGGCCAGAGGTAAGTGGACTTTAATTTTTTCTGCTAAGCCCAACACTCCACCACACCCAGGCACACACTACACACACCCACCCGTCTCAGGGTCCCCTCGGA(SEQ ID NO.:8)；以及

CGAGGAGGCGCCCGGAGTGGGGCCGGTCGGCTGGGCTGGCCGAGCCCGGGTCTGGGAGGTCTGGGGTGGCGAGCCTGCTGTCTCAGGAGGGGCCTGGCTCCGCCGGGTGGCCCTGGGGTAAGTCTGGGAGGCAGAGGGTCGGCCTAGGCCCGGGGAAGTGGAGGGGGATCGCCCGGGTCTCTGTTGGCAGAGTCCGGGCGATCCTCTGAGACCCTCCGGGCCCGGACGGTCGCCCTCAGCCCCCCAGACAGACCCCAGGGTCTCCAGGCAGGGTCCGGCATCTTCAGGGGCAGCAGGCTCACCACCACAGGCCCCCCAGACCCGGGTCTCGGCCAGCCGAGCCGACCGGCCCCGCGCCTGGCGCCTCCTCGGGGCCAGCCGCCGGGGTTGGTTCTGCCCCTCTCTCTGTCCTTCAGAGGAACCAGGGACCTCGGGCACCCCAGAGCCCCTCGGGCCCGCCTCCAGGCGCCCTCCTGGTCTCCGCTCCCCTCTGAGCCCCGTTAAACCCAAAGAATGTCTGAGGGGAGCCACCCTCGG(SEQ ID NO.:9)。