[发明专利]用于靶向MS方法中的自适应保留时间的前哨信号

说明书

接收将用于监测样本的多个MRM跃迁并且将所述MRM跃迁分成两个或两个以上连续组。在每个组中选择标识所述两个或两个以上连续组中将被监测的下一组的至少一个前哨跃迁。将所述两个或两个以上连续组中的第一组置于串联质谱仪的占空比列表上。从所述样本中分离一种或多种化合物并对所述化合物进行电离，从而产生离子束。由所述串联质谱仪对所述离子束执行从所述占空比列表读取的一系列MRM跃迁。当检测到所述第一组的至少一个前哨跃迁时，将由所述前哨跃迁标识的下一组置于所述列表上。

相关申请的交叉引用

本申请主张于2015年12月1日提交的美国临时专利申请序列号62/261,498的权益，所述美国临时专利申请的内容通过引用以其全部内容并入本文。

介绍

各个实施例涉及使用质谱仪分析物质。具体地，各个实施例涉及通过与联用技术相结合的质谱法检测物质和相对或绝对地定量物质。例如，根据信号的连续检测来监测连续组的兴趣物质。

多年来，分离系统与质谱仪之间的结合一直用于检测和定量复杂混合物中的物质。例如，就像分光光度计一样，质谱仪可以用作通过色谱法或毛细管电泳分离的物质的选择性检测器。被检测的物质可以是小的有机分子，如例如药物、掺杂分子、杀虫剂、代谢物、蛋白质或肽。通常，使用质谱仪与分离技术之间的结合的检测和定量方法使用碎片化步骤(串联质谱法——质谱法-质谱法(MS-MS)、MS2、MSn)。通常，碎片化是通过离子与惰性气体之间的碰撞过程获得的，但也可以由与电子、光子或表面的相互作用产生。由于完整物种之间的信息与其碎片或产物离子的相对强度的组合，寻求此碎片化步骤以确保最高可能的检测特异性水平。第二特异性水平由物质在分离过程中的相对或绝对保留时间提供。

通过质谱法执行物质检测和/或定量的最常用方法是所谓的靶向方法。尽管任何允许MSn实验的仪器都是合适的，但是靶向方法主要在三重四极杆质谱仪上进行，所述质谱仪由对三个四级杆的组装而产生。在这种使用模式下，质谱仪被设置成记录与被称为跃迁的事件相关联的信号，其中前体离子(通常对应于整个物质)在第一四级杆中过滤，然后在第2四级杆中碎片化，并且一个或者连续多个产物离子在第3四级杆中过滤。重要的是，此处要注意，当质谱仪保持观察跃迁时，与此跃迁相关的信号更强烈。

当观察到同一分子的多个跃迁时，并且甚至更重要的是当观察到待定量的若干分子的多个跃迁时，有必要调整观察时间以确保色谱或电泳峰的形状的完美定义。人们认为，绘制此峰通常需要至少10个测量点，以确保定量准确度和令人满意的准确度。

因此，如果色谱峰具有10秒的基线宽度并且跃迁的观察时间(停留时间)是10毫秒，那么由于其总观察时间为100x 10毫秒＝1s，所以将可能监测多达100个跃迁。如果必须通过分子观察到两个跃迁，则在分析期间可以检测和定量不超过50个分子，或者如果将通过分子观察到n个分子跃迁，则检测和定量不超过100/n个分子。

在许多情况下，无论是基础研究还是应用研究，都期望观察数百种待定量的物质。例如，在检测和定量环境基质(水和土壤)或食品或生物流体中的杀虫剂时，情况是这样。另一个众所周知的背景是基于蛋白质组学的方法中对数百到数千种肽的靶向检测和定量。此背景可以是对生物标记候选物的临床评估研究或系统生物学的更基本背景。在这种情况下，需要通过限制跃迁的观察时间来避免通过最小数量的测量点强加以正确地定义峰的形状的限制。因此，不是在分离方法的持续时间内对跃迁的监测进行编程，而是仅在有限的时间窗口中对其进行跟踪。此观察时间窗口可以相对较大并且收集通过若干分子跟踪的必要跃迁。然而，最佳且经常保留的策略是仅在其保留时间窗口附近记录物质的特定跃迁。不同的商品名称引用此过程：例如，爱博才思(AB Sciex)的排程多反应监测(multiplereaction monitoring，MRM)、赛默(Thermo)的定时MRM、安捷伦(Agilent)的动态MRM。然而，多个原因可能导致保留时间的漂移。原因可能是主动的，例如，在液相色谱法中，实验者改变梯度的斜率、柱长度、流动相的组成或粒径。原因还可能与实验者无关并且由柱过载、柱的部分堵塞、流动相的温度变化产生。