[发明专利]检测癌症干细胞的方法

说明书

本发明涉及使用识别岩藻糖α1‑2半乳糖单元的凝集素作为标记结肠直肠癌干细胞的工具用于所述结肠直肠癌干细胞的检测和/或定量，以及在诊断侵袭性、复发风险和预后价值的方法中使用所述凝集素以便修改结肠直肠癌治疗。

本发明涉及检测癌症干细胞、特别是结肠直肠癌干细胞的领域。

结肠直肠癌(CRC)是世界上第三大常见疾病。像任何癌症一样，其可以总结为健康组织，在这种情况下是结肠粘膜中的异常细胞增殖，引起肿瘤块的出现。提出解释肿瘤发展以及抗性机制和复发的理论之一在于癌症干细胞的存在。肿瘤从放射和化学疗法治疗的治疗性逃脱取决于肿瘤内这些细胞的存在。因此，肿瘤组织中这些细胞的检测构成了定义肿瘤的侵袭性水平的工具。癌症干细胞的特异性生物标志物的表征因此在癌症治疗中引起极大的诊断和预后关注。然而，当前不存在癌症干细胞(CSC)的特异性标志物允许将癌症干细胞与其它肿瘤细胞明确相区分。

归因于癌症干细胞的小数目和特异性标志物的不存在，CSC研究中的主要困难在于其分离和表征。

因此，需要一种允许在结肠直肠肿瘤中检测结肠直肠癌干细胞的方法。

本发明满足那个需要。本发明的发明者已经鉴别了在细胞的这个群体的表面上表达的特异性聚糖作为结肠直肠癌干细胞的标志物。由适当工具识别这些特异性标志物使得有可能在存在非癌症非干癌细胞、癌症非干细胞以及非癌症干细胞的结肠直肠组织内检测和定量结肠直肠癌干细胞。

在第一个方面，本发明关于用于试管内检测和/或定量结肠直肠癌干细胞(CSC)的凝集素和潜在存在的标记结肠直肠癌干细胞的第二工具的用途。

在第二个方面，本发明关于一种检测和/或定量结肠直肠生物样品中的结肠直肠癌干细胞的方法。

在第三个方面，本发明涉及一种诊断结肠直肠癌的复发风险和/或侵袭性以定义预后价值以便修改结肠直肠癌治疗的方法。

在第四个方面，本发明关于一种包含凝集素和标记结肠直肠癌干细胞的第二工具的试剂盒，以及所述试剂盒用于检测和/或定量结肠直肠癌干细胞，特定地用于诊断结肠直肠癌的复发风险和/或侵袭性以定义预后价值以便修改结肠直肠癌的治疗的用途。

本发明的第一个主题因此涉及允许特异性地识别岩藻糖α1-2半乳糖单元的工具，特别是识别岩藻糖α1-2半乳糖单元的凝集素的用途，其用于检测和/或定量结肠直肠癌干细胞。

本发明特别涉及允许特异性地识别岩藻糖α1-2半乳糖单元的工具，特别是识别岩藻糖α1-2半乳糖单元的凝集素的用途，其用于试管内检测和/或定量结肠直肠生物样品中的结肠直肠癌干细胞。

结肠直肠癌干细胞是能够自我更新并且对化学疗法中所用的众多物质具抗性的静止细胞的群体。其还被称为癌症肿瘤起始细胞(TIC)。已经描述了结肠直肠癌干细胞并且已经成为评论的主题，例如，在Vaiopoulos等S,《干细胞(Stem Cells)》2012(30),363-371和Ricci-Vitiani等《分子医学杂志(J.Mol.Med.)》2009,87(11),1097-1104中。

本发明还涉及使用识别岩藻糖α1-2半乳糖单元的凝集素作为第一标记工具以实施试管内检测和/或定量结肠直肠生物样品中的结肠直肠癌干细胞的方法。

在本发明的含义内，“标记结肠直肠癌干细胞的工具”意指能够特异性地结合至在结肠直肠癌干细胞的表面上表达的标志物的物质。标记工具可以特别是针对抗原决定簇，诸如糖蛋白、蛋白质或聚糖的抗体。

根据本发明的识别岩藻糖α1-2半乳糖单元的凝集素有利地选自荆豆凝集素I(Ulex Europaeus Agglutinin I，UEA-I)和日本栝楼凝集素II(Trichosanthes JaponicaAgglutinin II，TJA-II)。优选地选自荆豆凝集素I。