[发明专利]具有改进的特性的ω-羟化酶相关的融合多肽变体

权利要求书

1.一种CYP153A-还原酶杂合融合多肽变体，其中所述CYP153A-还原酶杂合融合多肽变体的特征在于：在SEQ ID NO:38所示的氨基酸序列的基础上的以下突变：

(a)在SEQ ID NO:38的氨基酸位置12、27、28、119、141、157、159、231、233和244处的突变分别为Q12W、R27L、Q28M、K119R、V141T、S157R、V159M、A231Y、S233L和A244R；

(b)在SEQ ID NO:38的氨基酸位置12、28、119、140、157、159、233、244、254和407处的突变分别为Q12W、Q28M、K119R、S140N、S157R、V159M、S233L、A244R、R254G和N407G；

(c)在SEQ ID NO:38的氨基酸位置12、27、111、119、141、157、159、231、233、244和254处的突变分别为Q12W、R27L、F111A、K119R、V141T、S157R、V159M、A231Y、S233L、A244R和R254G；

(d)在SEQ ID NO:38的氨基酸位置12、28、119、140、149、157、159、231、233和407处的突变分别为Q12W、Q28M、K119R、S140N、P149G、S157R、V159M、A231Y、S233L和N407G；

(e)在SEQ ID NO:38的氨基酸位置12、27、28、119、140、157、159、233、244和407处的突变分别为Q12W、R27L、Q28M、K119R、S140N、S157R、V159M、S233L、A244R和N407G；

(f)在SEQ ID NO:38的氨基酸位置10、11、12、28、119、141、159、231、233、244和407处的突变分别为D10Y、I11L、Q12W、Q28M、K119R、V141T、V159M、A231Y、S233L、A244R和N407G；

(g)在SEQ ID NO:38的氨基酸位置11、12、27、28、119、141、157、159、197、231、233、244、407和477处的突变分别为I11L、Q12W、R27L、Q28M、K119R、V141T、S157R、V159M、A197T、A231Y、S233L、A244R、N407G和P477G；

(h)在SEQ ID NO:38的氨基酸位置11、12、28、119、141、157、159、197、231、233、244和407处的突变分别为I11L、Q12W、Q28M、K119R、V141T、S157R、V159M、A197T、A231Y、S233L、A244R和N407G；或

(i)在SEQ ID NO:38的氨基酸位置11、12、27、28、119、141、149、157、159、231、233和407处的突变分别为I11L、Q12W、R27L、Q28M、K119R、V141T、P149G、S157R、V159M、A231Y、S233L和N407G；

其中所述CYP153A-还原酶杂合融合多肽变体催化脂肪酸转化为ω-羟基化脂肪酸。

2.一种重组宿主细胞，其表达权利要求1所述的CYP153A-还原酶杂合融合多肽变体，其中所述重组宿主细胞是重组微生物细胞。

3.根据权利要求2所述的重组宿主细胞，其进一步表达EC3.1.2.-或EC 3.1.1.5的硫酯酶多肽。

4.根据权利要求3所述的重组宿主细胞，其进一步表达EC3.1.2.14的硫酯酶多肽。

5.一种产生ω-羟基化脂肪酸的方法，所述方法包括：

(i)在碳源存在下培养权利要求2-4任一项中所述的重组宿主细胞；和

(ii)收集ω-羟基化脂肪酸。

6.一种重组微生物，其包含经过工程改造以表达编码多肽的至少两个核酸序列的路径，所述多肽包含：

(i)EC 3.1.2.-或EC 3.1.1.5的硫酯酶；和

(ii)权利要求1所述的CYP153A-还原酶杂合融合多肽变体。

7.根据权利要求6所述的重组微生物，其中所述硫酯酶是EC3.1.2.14。