[发明专利]10-脱乙酰基巴卡丁III的纯化过程

说明书

本发明的主题涉及一种用于分离10‑脱乙酰基巴卡丁III的离心分配色谱(CPC)方法，其中将含有10‑脱乙酰基巴卡丁III的待纯化溶液在至少一个CPC工序步骤中进行纯化，并且在CPC工序步骤期间使用以下之一作为溶剂混合物：MEK/水、MTBE/丙酮/水和DCM/MeOH/水。本发明的主题还涉及用该方法生产的10‑脱乙酰基巴卡丁III溶液。

技术领域

本发明的主题涉及一种分离10-脱乙酰基巴卡丁III的方法，以及以这种方法产生的10-脱乙酰基巴卡丁III溶液。

背景技术

已经从属于二萜类的紫杉烷类化合物开发出了一些抗癌化疗药物，其广泛使用的实例包括多西他赛、卡巴他赛和紫杉醇，其中多西他赛和紫杉醇被列入WHO认为的最重要的药物清单(2016年WHO基本药物标准清单)。

它们的工业生产可以使用自然方法，或使用半合成或合成的方法进行。紫杉醇也可以在自然界中发现，然而量非常少，因此其通常在合成时由天然前体产生。多西他赛和卡巴他赛是由天然紫杉醇前体合成产生的化合物。这些化合物的全合成是已知的(Danishefsky，1996)，其使用生物技术(Navia-Osorio，2002)进行生产，最近已开始发挥工业作用。

这些化合物的前体是被称为式1的化合物10-脱乙酰基巴卡丁III(下文称为10-DAB III)：

10-DAB III可以在几种紫杉树中发现并提取出来(例如Taxus Baccata andTaxus Wallichiana species-(Németh-Kiss，1996))，但是以这种方式获得的物质含有过多的污染物。这些植物的许多部位(叶子、树枝、树皮)含有不同含量的这些物质，最经济的生产方法是从叶子中进行提取。然而，在制药工业中需要使用比这更纯的物质作为前体。初始材料的纯度由如图1和2中显示的色谱图表征(自己的测量值，Taxus Baccata(图1)和Taxus Wallichiana(图2)提取物)。

一些专利申请涉及10-DAB III化合物与其污染物的分离(例如专利申请US5969165A和US6002025A)。由于上述原因，纯化含有10-DAB III的混合物的主要目的是为了得到从制药工业的角度来看适当纯度的产品，其适合于多西他赛或紫杉醇的合成或生物合成。预期的纯度取决于紫杉醇的合成方法，但普遍预期高于98％或99％的纯度。

已经进行了一些与10-DAB III化合物的合成生产有关的实验(Danishefsky，1996)。

可以看出，用作制药工业前体的10-DAB III溶液可以用多种方式进行生产，然而，可以说以这种方式获得的溶液纯度不足。

已知制备型高效液相色谱(prep-HPLC)方法可用于纯化10-DAB III溶液(参见例如专利申请号US5670673A)。这些工序的特征在于高性能，并且可以用它们生产纯度98％的10-DAB III溶液，产率60％。然而，这些方法通常涉及大量使用溶剂和吸附剂，这使得用于制药工业的10-DAB III的生产成本高昂。

离心分配色谱(缩写为：CPC)是一种既高效又经济的色谱技术。一些专利申请涉及被污染的10-DAB III混合物的CPC纯化(例如参见美国专利号6,008,385和美国专利号5,723,635)。这些专利文献中公开的方法集中于某些污染物中提取物的纯化，使用它们不可能普遍去除所有污染物，因此使用这些方法不可能获得纯度99％的10-DAB III产品(Margraff，1995)。在天然提取物的情况下，由于这些提取物的成分各不相同(取决于季节、物种和来源)，这是一个普遍的问题。因此，上述污染物的组成也各不相同，因此用于纯化的方法必须对这些变化是强有力的，这些要求不能通过上述专利中公开的方案得到满足。