[发明专利]非重组人胰岛素-样生长因子结合蛋白浓缩物

说明书

人胰岛素‑样生长因子(IGF)结合蛋白储备溶液和制备它们的方法包括在水性缓冲介质中的非重组人IGF结合蛋白‑3 (nr‑IGFBP‑3)。所述储备溶液中的nr‑IGFBP‑3的浓度是在约16微克/毫升(µg/ml)至约40µg/ml范围内。包括nr‑IGFBP‑3的校准物集合的试剂盒。所述校准物的集合包括在约0.5µg/ml至约16µg/ml的范围内的不同浓度的nr‑IGFBP‑3，其被构造成包括患者样品的免疫测定中的IGFBP‑3分析物水平的可疑范围。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2015年12月31日提交的美国临时申请号62/274,116的优先权，其通过引用整体并入本文。

关于联邦资助的研究或开发的声明

不适用

背景

胰岛素-样生长因子(IGF)（例如，IGF-1和IGF-2）属于参与细胞生长调节的蛋白激素家族。肝分泌IGF-1，例如，作为生长激素(GH)刺激的结果。IGF的作用通过与胰岛素-样生长激素结合蛋白(IGFBP)的结合来介导。存在六种对IGF-1和IGF-2具有高亲和力的IGF结合蛋白(例如，IGFBP-1至IGFBP-6)，其中IGFBP-3是最占优势的。IGFBP促进IGF的作用的调节，以便实现以下一种或两种：在某些情形下抑制IGF作用，和在其它情形下促进IGF作用。具体地，IGF-1以1:1摩尔比结合IGFBP-3。看起来IGFBP-3的生成与IGF-1一样取决于生长激素GH，而相反，IGFBP-1生成受肽激素胰岛素调节。

IGFBP-3将在血流中的IGFBP-3的稳定复合物内的IGF（例如，IGF-1或IGF-2）和酸不稳定的亚基(ALS)蛋白(也是GH依赖性的)运输至身体组织，且IGFBP-3具有循环功能、细胞外功能和细胞内功能。例如，IGFBP-3可以结合来自不同细胞类型的IGF；可以阻断IGF向IGF受体的接近；可以与细胞表面处的蛋白相互作用；和可以结合细胞核中的激素受体。

为了表征健康和疾病的目的，监测人体中的IGF水平。例如，在结构上与胰岛素类似的IGF-1在儿童期生长中起重要作用。在儿童期发育中监测IGF的水平有助于表征发育是否是正常的。在其它例子中，IGF在监测糖尿病中和可能在监测老化和癌症中起重要作用。因此，通过血清免疫测定监测人类中的IGF的水平、特别是IGFBP-3水平会为监测儿童和成年人提供重要的诊断工具。

将来自人血清的患者样品的免疫测定的关于IGFBP-3水平的结果与一组已知IGFBP-3浓度的校准物或标准品进行对比。例如，在多种浓度制备IGFBP-3校准标准品，所述浓度包括在患者样品中预见到的IGFBP-3分析物的可疑目标浓度范围。使用校准物来校准免疫测定设备，包括、但不限于，IMMULITE®系统和CENTAUR®系统，例如，二者来自SiemensHealthcare Diagnostics, Inc.，使得可以准确地测量人患者中的IGFBP-3分析物水平。

尽管IGFBP-3在人血清中是相对丰富的，但是已经发现为了制备用于免疫测定的校准标准品集合而以足够浓度从人血液中分离IGFBP-3是有问题的和困难的。相反，人IGFBP-3的重组形式已经用于制备患者样品的免疫测定所用的校准标准品。

不幸的是，人IGFBP-3的商购可得的重组形式是昂贵的，且可能不具有IGFBP-3的纯人形式所具有的结构完整性。因此，在免疫测定校准标准品中使用人IGFBP-3的重组形式的负面影响可能是比仅仅成本问题更显著的。

发明概述

在某些实施方案中，根据本文描述的原理，提供了一种人胰岛素-样生长因子(IGF)结合蛋白储备溶液。所述人胰岛素-样生长因子(IGF)结合蛋白储备溶液包含在水性缓冲介质中的非重组人IGF结合蛋白-3 (nr-IGFBP-3)，其具有在约16微克/毫升(µg/ml)至约40µg/ml范围内的nr-IGFBP-3浓度。