[发明专利]多肽及其应用

说明书

一种多肽及编码所述多肽的核酸、包含该核酸的核酸构建体、表达载体、宿主细胞，以及在细胞表面呈递该多肽的抗原呈递细胞及其免疫效应细胞，以及包含该多肽的药物组合物、疫苗、抗体以及治疗方法、诊断方法和诊断装置，以及所述多肽在用于制备疫苗、诊断肿瘤试剂盒或药物组合物中的用途，以及所述多肽、核酸作为检查靶标在肿瘤诊断中的用途。

优先权信息

无。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体而言，本发明涉及多肽及其应用，更具体地，本发明涉及多肽及其在制备试剂盒、药物、疫苗中的用途，涉及多肽在预防或治疗受试者中与CCNA2基因突变相关的疾病的用途，涉及核酸、核酸构建体、表达载体、宿主细胞、药物组合物、抗原呈递细胞、免疫效应细胞、疫苗、抗体，涉及治疗方法、诊断方法和诊断系统。

背景技术

癌症，由于细胞内基因突变导致细胞增殖失控的一种疾病。目前已成为人类健康的重大威胁，是导致人类死亡的主要原因之一。世界卫生组织(WHO)在发表的《全球癌症报告2014》中指出，2012年全球癌症患者和死亡病例都在迅速增加，而新增癌症病例有近一半出现在亚洲，其中大部分在中国，中国新增癌症病例高居第一位。《2012年中国肿瘤登记年报》数据显示，中国每年新增癌症病例约350万，约有250万人因此死亡。因此，寻找高效特异的癌症治疗方法具有重大的临床价值。

传统的肿瘤治疗方法主要包括手术、放疗和化疗，但这几种方法都具有较大的局限性，比如由于癌细胞的近端入侵或远端转移，手术切除后的肿瘤转移复发率较高，而放疗和化疗对于机体自身的正常细胞尤其是造血系统和免疫系统会造成严重的损害，因此对于已发生肿瘤转移的患者也很难达到较好的远期疗效。随着肿瘤分子机制的深入研究和生物技术的进一步发展，靶向药物治疗和免疫治疗在肿瘤的综合治疗中发挥着愈来愈大的作用。靶向疗法主要包括单克隆抗体(有时归为被动免疫疗法)和小分子靶向药物，而免疫疗法主要包括细胞因子疗法、免疫检查点抑制剂、过继细胞回输和肿瘤疫苗等。免疫疗法通过调节机体的免疫系统，增强肿瘤微环境抗肿瘤免疫力，从而控制和杀伤肿瘤细胞，因此有效率高，特异性强，耐受性好的优点，在肿瘤治疗中具有广阔的前景。

肿瘤免疫治疗疫苗主要包括肿瘤细胞疫苗、树突状细胞(DC细胞)疫苗、蛋白多肽疫苗、核酸疫苗和基因工程疫苗。这些疫苗能够杀伤肿瘤的主要机制即是通过引起患者针对于肿瘤特异性抗原免疫反应，包括抗原抗体反应和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)特异性杀伤等，其中CTL特异性杀伤在肿瘤免疫反应中起了很大的作用。肿瘤特异性多肽是一种肿瘤特异性抗原，主要引起CTL特异性杀伤，它包括肿瘤突变的多肽以及肿瘤特异性高表达多肽。其中肿瘤突变的多肽由于其只存在于患者肿瘤组织，是肿瘤免疫治疗的一个特异性靶点，具有安全性好，及副作用小等特点。靶向肿瘤突变多肽的免疫治疗，以多肽特异性DC-CTL，以及肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)过继回输等方法为代表，具有良好的治疗效果。

肿瘤特异性多肽能够被CTL或TIL细胞识别，需要人类白细胞抗原HLA的抗原呈递功能。人白细胞抗原主要分为I和II两种亚型，I型HLA又主要分为A，B，C三种亚型，其中每种亚型，又根据其序列的不同，A，B，C三种亚型又可以分为多种亚型，HLA-A0201是HLA-A亚型中的一种，在中国人群中占比13％，具有较高的比例。不同的多肽与HLA-A0201亚型的结合力是不同的。在特定HLA亚型的肿瘤患者体内，HLA亚型决定了只能有部分突变多肽能与其HLA具有结合能力，并被其HLA递呈给CTL或TIL细胞。

然而，肿瘤免疫治疗仍有待进一步深入研究和开发。

发明内容

本发明是基于发明人对下列事实和问题的发现而提出的：

发明人经过大量的筛选试验，发现CCNA2基因的突变导致其编码的219位点的氨基酸由颉胺酸(Val,V)突变为苯丙氨酸(Phe,F)。突变后的CCNA2基因能够在肿瘤组织中特异性高水平表达，该突变基因编码的突变多肽具有肿瘤组织特异性。并且，发明人通过实验验证了该突变多肽序列与HLA-A0201具有高亲和力。