[发明专利]修饰的赖氨酸脱羧酶

权利要求书

1.一种CadA变体多肽，其在SEQ ID NO：2的氨基酸276-509的区域中的谷氨酸残基的一个被取代，其中所述谷氨酸残基位于蛋白表面，侧链朝向外部环境，位于所述蛋白缺少确定的二级结构的区段中，

其中所述取代位于选自位置291、344、355、463、482和499的位置处的谷氨酸残基，其中：所述位置344、463和499处的氨基酸取代是C，

所述位置291处的氨基酸取代是E291A/C/D/H/R/V/G/K/N/S，

所述位置355处的氨基酸取代是E355C/F/H/K/L/M/N/P/Q/R/S/T/V/Y，

所述位置482处的氨基酸取代是E482C/F/I/L/S/W/Y/A/H/K/M。

2.权利要求1的CadA变体多肽，其中所述氨基酸取代是E291A/C/D/H/R/V，E355C/F/H/K/L/M/N/P/Q/R/S/T/V/Y或E482C/F/I/L/S/W/Y。

3.一种遗传修饰的宿主细胞，其包含权利要求1或2的CadA变体多肽。

4.权利要求3的遗传修饰的宿主细胞，其中所述宿主细胞被遗传修饰以过表达一或多种赖氨酸生物合成多肽。

5.权利要求3或4的遗传修饰的宿主细胞，其中所述宿主细胞是细菌。

6.权利要求5的遗传修饰的宿主细胞，其中所述宿主细胞来自埃希氏菌属(Escherichia)、哈夫尼菌属(Hafnia)或棒杆菌属(Corynebacteria)。

7.权利要求5的遗传修饰的宿主细胞，其中所述宿主细胞是大肠杆菌(Escherichiacoli)。

8.权利要求5的遗传修饰的宿主细胞，其中所述宿主细胞是蜂房哈夫尼菌(Hafniaalvei)。

9.权利要求5的遗传修饰的宿主细胞，其中所述宿主细胞是谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)。

10.一种生产尸胺的方法，所述方法包括在表达CadA变体多肽的条件下培养权利要求3-9任一项的遗传修饰的宿主细胞。

11.一种多核苷酸，其包含编码权利要求1或2的CadA变体多肽的核酸序列。

12.一种表达载体，其包含权利要求11的多核苷酸。

13.一种遗传修饰的宿主细胞，其包含权利要求12的表达载体。

14.权利要求13的遗传修饰的宿主细胞，其中所述宿主细胞是细菌。

15.权利要求13的遗传修饰的宿主细胞，其中所述宿主细胞来自埃希氏菌属、哈夫尼菌属或棒杆菌属。

16.权利要求13的遗传修饰的宿主细胞，其中所述宿主细胞是大肠杆菌。

17.权利要求13的遗传修饰的宿主细胞，其中所述宿主细胞是蜂房哈夫尼菌。

18.权利要求13的遗传修饰的宿主细胞，其中所述宿主细胞是谷氨酸棒杆菌。

19.一种遗传修饰的宿主细胞，其包含权利要求11的多核苷酸，其中编码所述CadA变体多肽的核酸序列整合进宿主细胞染色体中。

20.权利要求19的遗传修饰的宿主细胞，其中所述宿主细胞是细菌。