[发明专利]一种用基因表达量来检测纳米材料细胞毒性的方法在审
申请号: | 201710002862.1 | 申请日: | 2017-01-03 |
公开(公告)号: | CN106636419A | 公开(公告)日: | 2017-05-10 |
发明(设计)人: | 何志昂;张建华;刘士德 | 申请(专利权)人: | 何志昂 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 518000 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基因 表达 检测 纳米 材料 细胞 毒性 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种纳米材料细胞毒性的检测方法,特别是涉及一种用基因表达量来检测纳米材料细胞毒性的方法。
背景技术
纳米材料的细胞毒性常用的检测方法是,观测纳米材料对生物个体各组织器官、细胞形态、细胞活性氧水平等的影响,以上检测并未涉及到基因水平。
发明内容
为解决背景技术中所存在的问题,本发明提供一种用基因表达量来检测纳米材料细胞毒性的方法,通过检测纳米材料对Hela细胞actin、Rab5、COX4、NF-kb基因表达量的影响来衡量纳米材料的细胞毒性。
本发明的技术方案是,一种用基因表达量来检测纳米材料细胞毒性的方法,其特征在于:包括如下步骤
1)将Hela细胞接种于不同的培养皿中12小时后向不同的培养皿中加入不同浓度的纳米二氧化钛继续培养48小时;
2)用RNA提取试剂盒提取各组Hela细胞的RNA,再用反转录试剂盒对所提取的RNA进行反转录,即得到QPCR的模板;
3)设计各目的基因actin、Rab5、COX4、NF-kb的引物;
4)用QPCR试剂盒在荧光定量PCR仪上检测各目的基因的表达量。
本发明的有益效果是:从基因水平检测纳米材料的细胞毒性,检测更加灵敏。
附图说明
图1是Hela细胞各目的基因在纳米二氧化钛胁迫下的相对表达量的统计图。
具体实施方式
上以下结合附图与具体实施例来进一步说明本发明。
本发明提供了一种用基因表达量来检测纳米材料细胞毒性的方法,其特征在于:包括如下步骤
1)将Hela细胞接种于不同的培养皿中12小时后向不同的培养皿中加入不同浓度的纳米二氧化钛继续培养48小时;
2)用RNA提取试剂盒提取各组Hela细胞的RNA,再用反转录试剂盒对所提取的RNA进行反转录,即得到QPCR的模板;
3)设计各目的基因actin、Rab5、COX4、NF-kb的引物;
4)用QPCR试剂盒在荧光定量PCR仪上检测各目的基因的表达量。
当纳米材料的细胞毒性越强时,各目的基因的相对表达量越高。
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