[发明专利]苦瓜降糖提取物复合剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生化制药领域，具体涉及一种源自苦瓜的天然降糖药物，特别涉及苦瓜多组分提取物的复合制剂。

背景技术

糖尿病是一种慢性病，难以根治并引发多种并发症，例如临床上常见的糖尿病并发肾病、糖尿病并发心脏病、非创伤性下肢切除、以及失明等。糖尿病分为I型和II型，其中II型糖尿病最常见，一般认为II型糖尿病是由于机体不能产生足够量的胰岛素或者对胰岛素的敏感度降低导致的新陈代谢疾病。除了注射胰岛素外，目前已经有几种临床上用于治疗胰岛素的药物，例如双胍类、葡萄糖苷酶抑制剂类、磺脲类等，然而上述药物都具有一定的缺陷，长期服用副作用明显或产生抗药性。

苦瓜(Momordica charantia L.)为葫芦科苦瓜属植物，现代药理研究结果表明，苦瓜具有降血糖、抗肿瘤、抗病毒、抗菌、免疫调节等多种药理活性，其中降血糖活性最为显著。苦瓜在哺乳动物模型和人体中的降血糖活性已经得到证实，但其中的降血糖成分及作用机理还不完全清楚。关于苦瓜在降血糖中的用途，目前主要是以苦瓜为原料，利用水提、醇提等方法制备含有降血糖活性的提取物，也有一些研究利用苦瓜酶解物制备膳食纤维用于调节血糖。然而按照通常的研究方法从苦瓜中提取、纯化降糖活性成分时，往往发现相对单一的提取物或纯的成分丧失了降糖功能。例如，目前从苦瓜中成功分离纯化的活性成分——苦瓜苷虽有清热、解毒、利尿的功效，但降血糖的效果并不稳定。

苦瓜膳食纤维对糖尿病有一定的治疗作用，现有技术膳食纤维的提取通常是化学法和两步酶解法。化学法不可避免的导致提取的膳食纤维残留有化学药物，带来潜在的食品安全隐患；两步酶解法步骤复杂，成本高，提取效率不高，目前两步酶法提取膳食纤维主要使用木瓜蛋白酶及淀粉酶，特别是对于具有降糖活性的可溶性膳食纤维提取率通常仅在10％左右。

发明内容

本发明针对苦瓜单组分提取物降糖效果不佳的技术问题，将现代药材活性成分提取技术和传统中药复配原则相结合，一方面，根据基于目前已有的研究和不同的提取方法，优化提取条件，提取苦瓜中不同的降血糖活性组分。另一方面，根据苦瓜中各种降糖活性组分的天然含量，对提取的降糖活性组分进行复配，使复配后的复合制剂最大程度的接近各组分在苦瓜中的天然比例。本发明以苦瓜中各降糖组分的天然含量为配比依据，从而使各活性成分达到协同降糖的作用。蜗牛酶是一种从蜗牛内脏中提取的一种复合酶系，本发明将蜗牛酶用于处理苦瓜渣生产膳食纤维，提高了可溶性膳食纤维的产量。

一方面，本发明提供一种苦瓜降糖提取物复合制剂，降糖活性成分包括活性肽提取物、耐热活性提取物、可溶性膳食纤维提取物，其特征在于所述复合制剂中活性肽提取物、耐热活性提取物和可溶性膳食纤维提取物三者的比例与苦瓜中三种组分的天然含量一致。

本发明所述苦瓜降糖提取物复合制剂，其中活性肽提取物：耐热活性提取物：可溶性膳食纤维提取物按干物质含量计为1∶5-10∶500-1000。

本发明所述的苦瓜降糖提取物复合制剂，其中所述活性肽提取物的制备方法包括：取新鲜苦瓜，洗净，加入5-10倍生理盐水4℃匀浆，匀浆液15000×g离心30min，上清液依次经过4层纱布过滤、watman滤纸、0.22μm滤膜三级过滤，0.22μm过滤的滤液过10kDa的截留膜，取分子量小于10kDa的级分浓缩，得活性肽。

本发明所述的苦瓜降糖提取物复合制剂，其中耐热活性提取物的制备方法包括：将水浸提法制备苦瓜活性肽产生的沉淀和滤渣合并用5-10倍体积50-90％的乙醇加热回流提取3次，每次提取时间为0.5-4小时，过滤取上清，合并上清液，减压浓缩，得耐热活性提取物。

本发明所述的苦瓜降糖提取物复合制剂，其中可溶性膳食纤维提取物的制备方法包括：将经过水提取、醇提取后产生的苦瓜渣烘干，加入pH4-6.5的醋酸缓冲溶液中，然后加入0.4-1％重量份的蜗牛酶37℃恒温水浴酶解1-3h，酶解完成后加热至100℃灭酶5min，抽滤取滤液，向滤液中加入2-5倍体积的无水乙醇、搅拌均匀、静置过夜，离心取沉淀，得可溶性苦瓜膳食纤维。

第二方面，本发明提供所述苦瓜降糖提取物复合制剂在制备治疗糖尿病药物中的应用，例如，所述苦瓜降糖提取物复合制剂在制备降低空腹血糖药物中的应用、所述苦瓜降糖提取物复合制剂在制备提高糖耐量药物中的应用。

第三方面，本发明提供一种综合利用苦瓜生产降糖复合提取物的方法，特征在于包括以下步骤：