[发明专利]一种成骨生长肽的低成本纯化方法有效
| 申请号： | 201710004722.8 | 申请日： | 2017-01-04 |
| 公开（公告）号： | CN106632612B | 公开（公告）日： | 2020-05-19 |
| 发明（设计）人： | 苏晨灿;王慧;郭添;韩广;张忠旗;王万科;王惠嘉;赵金礼;杨小琳 | 申请（专利权）人： | 陕西慧康生物科技有限责任公司 |
| 主分类号： | C07K7/08 | 分类号： | C07K7/08;C07K1/20;C07K1/18 |
| 代理公司： | 北京市浩天知识产权代理事务所(普通合伙) 11276 | 代理人： | 刘云贵;周华宁 |
| 地址： | 710054 陕西省西安市雁*** | 国省代码： | 陕西;61 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 生长 低成本 纯化 方法 | ||
1.一种成骨生长肽的纯化方法，其特征在于，包括：
(1)粗纯：将成骨生长肽粗品水溶液上样至反相聚合物柱，用酸性流动相进行梯度洗脱，收集洗脱液并减压浓缩得到浓缩液；
(2)转盐：将步骤(1)得到的浓缩液上样至弱阴离子交换柱，用醋酸洗脱，收集醋酸型成骨生长肽溶液，减压浓缩与冷冻干燥得到成骨生长肽；
其中，所述反相聚合物柱是填料为F型SBC MCI GEI反相色谱填料的反相聚合物柱；所述弱阴离子交换柱是填料为DEAE高流速琼脂糖微球的弱阴离子交换柱；所述酸性流动相由流动相A和流动相B组成；流动相A是三氟乙酸-水溶液，流动相B是三氟乙酸-甲醇溶液。
2.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述成骨生长肽粗品水溶液通过将成骨生长肽粗品溶解于水，超声分散，用滤膜过滤并收集滤液来制备。
3.根据权利要求2所述的纯化方法，其特征在于，成骨生长肽粗品与水的比率是(0.3g～5g):(5ml～100ml)。
4.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述F型SBC MCI GEI反相色谱填料的粒径是30～50μm。
5.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述DEAE高流速琼脂糖微球的粒径是50～160μm。
6.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，流动相A是0.1mol/L三氟乙酸-水溶液，流动相B是0.1mol/L三氟乙酸-甲醇溶液。
7.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，步骤(1)中，所述酸性流动相梯度选择0到15分钟流动相A:流动相B由(90～95):(10～5)到(85～80):(15～20)，15到65分钟流动相A:流动相B由(85～80):(15～20)到(70～65):(30～35)。
8.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，步骤(1)得到的浓缩液中成骨生长肽的含量是30～50mg/ml。
9.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述酸性流动相的流速是4ml/min，所述醋酸的流速是4ml/min。
10.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，上样和洗脱时的柱温为35-45℃。
11.根据权利要求10所述的纯化方法，其特征在于，上样和洗脱时的柱温为40℃。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于陕西慧康生物科技有限责任公司，未经陕西慧康生物科技有限责任公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201710004722.8/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：多参数监护设备
- 下一篇：与柯萨奇病毒腺病毒受体相关的亲和肽
